糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,,SO濃度高,,染色時(shí)間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,,反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。染色過程中不能接觸伊紅,,以免造成顏色誤差[4],。作糖原染色時(shí),較好作消化對(duì)照,,即取兩張連續(xù)切片,,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽性,,即肯定為糖原[6],。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,,不能保存,因此,,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純,。器皿,、染色缸必須潔凈而干燥。糖原累積病診斷和研究 ,,糖尿病的診斷和研究 ,,用于某些的診斷等。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中,。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷,。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞POX染色多呈細(xì)小顆粒弱陽性反應(yīng),。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水,。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用),。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘,。(7)脫水,、透明、封蓋,。結(jié)果:糖原呈紅色,,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體,、霉菌、色素,、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,,不主張應(yīng)用唾液如PAS染色可顯示糖原,、黏液等。
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1,、糖原的固定要及時(shí),,而且標(biāo)本要新鮮。2,、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是。4,、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號(hào),其效果就可能不同,,應(yīng)特別引起注意再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì),。江西糖原染色試劑盒廠家直銷
腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性,。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,,主要用來檢測(cè)組織中的糖類,。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,,糖原染色,。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,,紅色,定位于胞漿上,。3,、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等~山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格