要準(zhǔn)備的器具：組織剪2把,，有齒鑷1把，無齒鑷1把,，200ml燒杯1個(gè),，培養(yǎng)皿1個(gè)，帶蓋廣口瓶1個(gè),，離心管,、小瓶數(shù)個(gè)，滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液,。取大鼠尾巴，洗凈,，置75%酒精浸泡消毒后,，手持尾巴，用止血鉗夾住尾巴較高,，折斷尾骨后拉出尾腱,，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中，稱尾腱的重量,，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,，搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小時(shí),，離心。吸取其上清,，分裝至小瓶,，4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,。天津鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,，培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,，平均厚度約為1mm,；HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開；掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接,；同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,，為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑,。珠海鼠尾膠原價(jià)格鼠尾膠原，是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,。

鼠尾膠原蛋白I型，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,，這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法,，經(jīng)過乙酸抽提、離心,、滅菌,、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級(jí)別產(chǎn)品,，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被），適合多種類型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,、胚胎細(xì)胞、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞,、神經(jīng)鞘細(xì)胞等。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,，規(guī)格為6/24孔板,，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附,。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率，細(xì)胞增殖速度快,，形態(tài)均一,，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高。通常情況下骨質(zhì)總量中的鈣,、鎂,、磷等無機(jī)物質(zhì)光占總量的百分之幾而膠原蛋白等有機(jī)物質(zhì)卻要占超過80%。

膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型，但為常見的為I、II,、III型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。劃重點(diǎn)：任何動(dòng)物的膠原都有許多共性,，I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良，鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白,。于是,，動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明：一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮,、豬皮、牛腱中提取,，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠。天津鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)

這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),，可以用來當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。天津鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)

鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1,、vWF,、CD34、VE-cadherin,、GATA-2,。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31,。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能,。說明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞。為研究胞外基質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號(hào)分子機(jī)制打下了基礎(chǔ),。天津鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)