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來源: 發(fā)布時間:2024-02-05

研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,,并初步闡明其分子機制,。研究加深了對瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認識,為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎,。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對象,,從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體,并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內部,,并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進行對照,。研究發(fā)現(xiàn),瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成,。進一步的研究發(fā)現(xiàn),,瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內皮細胞VEGF受體(VEGFR2)的表達從而阻斷血管生成的信號通路。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對瘧原蟲抗病機理的理解,,并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進一步的理論依據(jù),。外泌體提取:基于聚合物的沉淀技術,。北京外泌體提取試劑廠家推薦

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外泌體提?。撼叽缗抛枭V,。尺寸排阻色譜(Size-exclusionchromatography,SEC)是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子,。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子,,分子根據(jù)其直徑通過微球,半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移,,而大分子則從色譜柱中更早地洗脫,。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外,,可以將不同的洗脫溶液應用于該方法,。與離心方法相比,色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,,因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,,這可能會改變囊泡的結構。目前,,SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術,。不過,該方法耗時較長,,不適合大量樣本處理深圳正規(guī)外泌體提取試劑直銷價超濾離心法簡單高效,,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法,。

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可以,。為了能夠高效提取細胞培養(yǎng)上清中的外泌體,磁珠可重復使用5次(同一樣品),。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量,。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收,提取時可進行反復抽提,,提高提取效率,。用血液樣品進行實驗時,需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復利用,;若磁珠發(fā)生聚集,,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,不建議繼續(xù)使用,。詳情參考操作說明書,。太好了,這樣實驗成本瞬間就降下來了,,那樣品純化所需的比較低量是,?老師:使用旋轉器的需要500μL以上,使用離心管混合器的需要100μL。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠,。同學:電鏡分析需要外泌體的量是多少,?

研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性。與脂質體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,,外泌體含有可能增強內吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,,從而促進其內容物的遞送。CD47是外泌體蛋白質之一,,是一個普遍表達的整合素相關跨膜蛋白,,其部分功能可以保護細胞免受吞噬作用。CD47是信號調節(jié)蛋白α(SIRPα,,也稱為CD172a)的配體,,CD47-SIRPα間的結合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進胰腺病細胞增殖,,增強胞飲作用從而促進一些病癥細胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細胞有一定毒性作用,,但使用外泌體能夠較小化對細胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),CD47和病基因KRAS驅動的胞飲作用都會壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,,并增強胰腺病細胞對外泌體的特異性,。所以,外泌體的這種特性增強了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實驗PDAC小鼠模型的總生存期,。多聚物沉淀法早先應用于從血清等樣本中收集病毒,,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,。

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專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基來進行體外培養(yǎng),直接把外泌體從尿液中沉降下來,,無須分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基,。人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法,是首先分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基,,將人尿液來源細胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾,,以去除大的細胞殘片以及其它雜質;然后離心除去細胞器,,留取上清,;再使用可截留100KD分子量的膜,通過離心截留上清中的外泌體,,截留完成后,,使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。外泌體提?。菏褂每贵w包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體,。石家莊正規(guī)外泌體提取試劑直銷價

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外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63,、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,,即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高、操作簡便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,,不利于下游實驗,,難以普遍普及。2,、多聚物沉淀法,。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀,,早先應用于從血清等樣本中收集病毒,,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結合游離水分子有關,。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,,產生難以去除的聚合物,,機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等北京外泌體提取試劑廠家推薦