無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分。無(wú)血清細(xì)胞,,無(wú)血清干細(xì)胞及MSC凍存液,。保存條件:儲(chǔ)存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,,為期3年,。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能冷凍保存,。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過(guò)80%,。與含血清凍存液比較,,BI無(wú)血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無(wú)血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存,。程序降溫法使用的凍存液主要配方為培養(yǎng)基,、血清、DMSO,。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷(xiāo)
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,,可導(dǎo)致炸列,。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,,但二甲基亞砜(DMSO)對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,,因此,,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化,。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品,。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。南京唐山無(wú)血清細(xì)胞凍存液需液氮凍存,,且不能原位(如孔板)凍存,。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分,。一些保護(hù)劑,,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),,較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無(wú)動(dòng)物源組份,。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無(wú)需冷凍,,即取即用,。凍存細(xì)胞,無(wú)需程序降溫,。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上,。
細(xì)胞凍存:細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過(guò)程中,在培養(yǎng)器具,、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),,而且細(xì)胞一旦離開(kāi)活的開(kāi)始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化,。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的,。原理:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力,。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,,否則在復(fù)蘇過(guò)程中有可能會(huì)炸,。
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1,、凍存液比例一般是培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1或5:4:1,;動(dòng)物種屬的原代細(xì)胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基:血清:DMSO=0:9:1,即直接用血清重懸細(xì)胞再加入DMSO,,盡管如此,,原代細(xì)胞的復(fù)蘇成活率還是很低。2,、有文獻(xiàn)表明,,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生,。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確,,目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min,、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中,。含血清,細(xì)胞污染(細(xì)菌,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高,。成都無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成,。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷(xiāo)
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1、細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附,。2、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,,分裝過(guò)多,,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁,。3,、加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話(huà)那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度,。太原無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷(xiāo)