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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-03-27

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,,可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,,內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間,,其中包含RNA,、蛋白質(zhì)、microRNA,、DN段等多種物質(zhì),,存在于血液、唾液,、尿液,、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,,雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”,,所以才被排出來,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今,,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。靜置10~15分鐘,,留取沉淀物備用。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

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可以,。為了能夠高效提取細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體,,磁珠可重復(fù)使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量,。1mL體積以上細(xì)胞上清樣本建議進(jìn)行濃縮后再回收,,提取時(shí)可進(jìn)行反復(fù)抽提,提高提取效率,。用血液樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復(fù)利用,;若磁珠發(fā)生聚集,,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,不建議繼續(xù)使用,。詳情參考操作說明書,。太好了,這樣實(shí)驗(yàn)成本瞬間就降下來了,,那樣品純化所需的比較低量是,?老師:使用旋轉(zhuǎn)器的需要500μL以上,使用離心管混合器的需要100μL,。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠,。同學(xué):電鏡分析需要外泌體的量是多少?南京正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)外泌體的提取方法:多聚物沉淀法,。

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外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):純化和富集的完整血漿/血清,,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究;樣本輸入量多樣,;無需耗時(shí)的超速離心,,過濾或特殊注射器;無需沉淀試劑,,也無需過夜培養(yǎng),;無需蛋白酶處理;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,;可以使用NanoSight®或電子顯微鏡分析純化的外泌體,以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中,攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子,,形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)

外泌體因諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)而被眾人知曉,,也因其作為生命信息傳遞者,在體液中普遍存在及易獲得性等特點(diǎn)被譽(yù)為液體活檢"新貴",,成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點(diǎn),,尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[。外泌體作為細(xì)胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受,。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA,,RNA,蛋白質(zhì)和其它分析物,,研究表明,,外泌體中的運(yùn)轉(zhuǎn)RNA和蛋白質(zhì)與一些病癥的生長(zhǎng)密切相關(guān),有望作為診斷標(biāo)志物,。研究發(fā)現(xiàn)Vps4A是一個(gè)外泌體的重要調(diào)控因子,,與肝病的發(fā)生有著密切的關(guān)系,Vps4A基因的表達(dá)下調(diào)肝病的發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān),。通過microRNA高通量測(cè)序發(fā)現(xiàn)Vps4A基因能導(dǎo)致外泌體分泌肝病相關(guān)的重要microRNA,,與肝病的發(fā)生密切相關(guān)。外泌體是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。

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外泌體的提取,、分離方法:免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,,主要用于生物大分子的分離、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,,這使得提取的外泌體純度高,但是產(chǎn)量低,。Zarovni等分別用超速離心,、密度梯度離心和免疫層析法,從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白,,結(jié)果表明,,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix、CD9,、CD63),,同時(shí),ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。由于國(guó)內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏,,我國(guó)對(duì)外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進(jìn)口提取試劑盒,。徐州外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體(Exosome)發(fā)現(xiàn)于1986年,是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)

外泌體在肺病治病中的作用:有研究發(fā)現(xiàn),,使用外泌體運(yùn)載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細(xì)胞對(duì)PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細(xì)胞毒性,,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展,。Aqil等在進(jìn)行裸鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強(qiáng)的抗一些病癥功效,,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,,由此可以證明,外泌體制劑可以有效增強(qiáng)CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性,。到目前為止,,外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,有效的外泌體藥物遞送平臺(tái)的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在治病靶點(diǎn)的探索,。已有的研究表明外泌體在肺病治病領(lǐng)域有著廣闊的前景,,期待外泌體在肺病治病領(lǐng)域早日得到突破,,造福更多的患者,。正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商通過超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)