PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實驗材料,。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,,過濾,,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng),。上海糖原染色試劑盒報價
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色,。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性,。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外,。(4)溶于弱堿溶液,。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,,結(jié)果,;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,,核呈藍色。2,、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì),。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘,。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序,。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,,水洗。(6)常規(guī)脫水,、封片江西糖原染色試劑盒單價擁有日本進口的各種染料,,保證切片染色效果。
彈力染色應(yīng)用:(1)動靜脈的辨認:在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認時,,彈力纖維染色有助于辨認,。有彈力板者為動脈,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管,。彈力纖維抗損傷能力較強,,故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,,非真性,。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生,。彈力纖維染色有助于診斷,。(4)彈力纖維損傷性疾病:這組疾病有肺氣腫、,、大動脈中層炎癥等,,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶,。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,,因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中,。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法,、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高),。其中較為常用的是組織化學(xué)法組織石蠟切片的染色檢測。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水,。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘,。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用),。(3)蒸餾水洗,,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘,。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水,、透明,、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,,細胞核呈藍色,。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色,。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差~常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進行特殊染色,。天津哪家提供糖原染色試劑盒哪家便宜
糖原累積病診斷和研究 ,,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等,。上海糖原染色試劑盒報價
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定,。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,,更易溶于水,,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,,宜采用酒精性固定液,,如Carnoy液,能較好地保存糖原,,但有使糖原流動到細胞一側(cè)的現(xiàn)象,,多數(shù)人認為是由于固定劑把細胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳,。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施,。乙醇能沉淀白蛋白,、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,,但仍可溶于水,,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳上海糖原染色試劑盒報價