經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA：這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀,，但確有實驗支持：經(jīng)典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點,，源自一則作者自撤稿的故事,。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學(xué)家，專做RNA相關(guān)的研究,，包括miRNA,。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個奇怪的“現(xiàn)象”，即貼壁細(xì)胞在消化之后,，會有一些miRNA的豐度突然降低,，看起來好像是被快速“降解”掉了，并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上,。但很快她們就發(fā)現(xiàn),，這個“現(xiàn)象”難以重復(fù)：如果用Trizol做實驗，就一定是陽性結(jié)果,，而用試劑盒提RNA,，就重復(fù)不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題,？確實如此,。經(jīng)進(jìn)一步實驗后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失,。RNA定量方法與DNA定量相似,。重慶正規(guī)RNA提取試劑報價

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子,。注意：大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,，彼此用氫鍵相連,，所以在甲醛變性膠中，沒有28S帶出現(xiàn)。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5～10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5～8.2之間)檢測其在OD260的光吸收,。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),，進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量),。RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng),。重慶正規(guī)RNA提取試劑報價植物花總ＲＮＡ提取試劑盒：特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解,。

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點：1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA，與細(xì)胞核RNA,。2.方便快捷的離心柱操作方式,。3.提取的RNA，品質(zhì)高,，產(chǎn)量多,。4.試劑盒不含苯酚，可提取所有RNA（含RNA）,。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,，包括RT-PCR，qRT-PCR,，RNA-Seq,，陣列等。6.細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,，可直接用于RT-PCR/qRT-PCR,。7.試劑盒可用于哺乳動物細(xì)胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,，研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA，而不是總RNA,。例如,，在一些表達(dá)譜研究中，較好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)（Cytoplasmic）RNA,?；蛘撸谘芯糠治鑫醇艚拥腞NA前體時,，提取細(xì)胞核（Nuclear）RNA會是一個更好的選擇,。然而，市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,，不光費用高昂,，而且浪費大量的材料與時間,。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速，簡單,，經(jīng)濟有效的方法

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑,。在破碎和溶解細(xì)胞時能保持RNA的完整性。無論是人,、動物,、植物還是細(xì)菌組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果,。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,，所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,，故而能夠作RNA印跡分析,、斑點雜交、poly(A)+選擇,、體外翻譯,、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實驗對照顯示,，公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量~細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點：細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,，直接用于RT-PCR/qRT-PCR。

RNA穩(wěn)定方法：1.在裂解緩沖液中立即溶解,，使RNase失活,。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield),，使核酸酶失活,，并在環(huán)境溫度下長時間保護(hù)核酸。這對正在實地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢,、全血等)的研究人員特別有幫助,。確保樣品完全溶解：在RNA提取過程中，較大限度地提高RNA產(chǎn)量和質(zhì)量的較佳方法是保證樣品的完全裂解,。然而,，并不是所有的樣本都對相同的裂解方案敏感。例如,，血細(xì)胞(如淋巴細(xì)胞,、PBMCs等)和微生物細(xì)胞往往更難以有效地溶解。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的,。為了提高裂解效果,，可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配，或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K,、溶菌酶等),。細(xì)菌總ＲＮＡ提取試劑盒：本試劑盒可以快速從細(xì)菌體內(nèi)提取總RNA,。重慶正規(guī)RNA提取試劑報價

血漿/血清RNA提取試劑盒：30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程，提取的總RNA純度高,。重慶正規(guī)RNA提取試劑報價

細(xì)胞RNA提取的方法：實驗提取步驟：標(biāo)準(zhǔn)Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心,。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分鐘,，用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進(jìn)口EP管中,。加入1/5體積的氯仿，上下混勻液體,，4度靜置10-15分鐘,。（氯仿為有機溶劑，有效的使有機相和無機相迅速分離,。有機相中主要是酚和蛋白結(jié)合,，從而使得蛋白和RNA脫離，RNA進(jìn)入水相）,。4度離心15分鐘,，一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,，RNA在上清里,，從離心機輕輕拿出EP管，以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起,。吸取上清的時候一定要動作輕柔,，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul,，避免吸到下層沉淀,，將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,，4度靜置10min,，然后12000rpm離心10min。重慶正規(guī)RNA提取試劑報價