細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗,。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,，起到了細胞保種的作用,。為什么要進行細胞凍存？連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,，有限細胞系較終會發(fā)生衰老,，所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染，即使運轉(zhuǎn)情況較好的實驗室也會遇到設(shè)備故障的問題,。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,，更換細胞系成本高昂，而且耗費時間,，因此,，十分有必要將細胞冷凍起來長期保存。除此之外,，還可以利用細胞凍存的形式來購買,、寄贈、交換和運送某些細胞,。PH,，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡,。徐州無血清細胞凍存液推薦廠家

細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力,。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,，減少細胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷,。理論上儲存時間是無限的。南京正規(guī)無血清細胞凍存液廠家推薦無血清細胞凍存液使用方法：緩慢地混合均勻,，制成細胞混合液,。

無血清細胞凍存液相對于含血清細胞凍存液的優(yōu)勢有：1.即用型，無需現(xiàn)配,，直接將細胞懸浮于凍存液中即可,。2.通用型，適用于凍存各種細胞系,、原代細胞,。3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存,，操作簡單,。4.不含血清，較大減少細胞污染,。5.因不含血清,，批次間差異小。6.無需液氮,，-80℃冰箱長期凍存,。7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程,。無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,，含DMSO、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液,。

細胞凍存經(jīng)驗談:選對凍存培養(yǎng)基才是王道：研究人員經(jīng)常需要冷凍細胞并保存，以供后續(xù)實驗或臨床使用,?；具^程相當簡單：慢慢冷凍細胞，將凍存管放入液氮中,，并在需要時快速解凍,。凍存培養(yǎng)基能支持細胞并防止冰晶形成。不過,，Malfavon的體驗告訴我們,，使用不同的凍存培養(yǎng)基，結(jié)果那可是大不同,。一些經(jīng)驗老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基,。不過,，那些面對脆弱細胞（比如原代和多能細胞）的研究人員，則更喜歡購買標準化的商業(yè)產(chǎn)品,。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益,，以避免細胞在解凍時凋亡。無任何外源蛋白和血清,，適用于各類動物細胞株凍存,。

細胞凍存注意事項：1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡,。此項尤為重要,，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,，可導致炸列,。2.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述,，但二甲基亞砜（DMSO）對細胞不是完全無毒副作用,，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,，因此,，必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,，會造成細胞的損傷,，二甲基亞砜（DMSO）選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液,。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷,。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：即用型,，無需現(xiàn)配，即開即用,。廈門武漢無血清細胞凍存液

無血清細胞凍存液存儲條件：推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。徐州無血清細胞凍存液推薦廠家

使用方法：1)細胞超凈臺無菌環(huán)境,，1.5mlEP管內(nèi)加入細胞混懸劑均勻混懸細胞,，細胞終濃度為5×106個/ml，混懸液體積為200μl,。細胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,，逐滴加入細胞凍存劑800μl，細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4,。2)開啟程序性降溫,，降溫速率為1℃/min，較后降溫至-80℃以下進行凍存,。將比較例1凍存后細胞的復(fù)蘇率與實施例5凍存后細胞的復(fù)蘇率進行對比,，具體結(jié)果如附圖1所示，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復(fù)蘇率,。其他實施例通過與比較例1進行比較,，也得到相同的試驗結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復(fù)蘇率,，同時還可減少不同批次細胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定,、以及避免由血清中的支原體，細菌,，朊細菌及其他細菌顆粒引發(fā)的污染,。徐州無血清細胞凍存液推薦廠家