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來源: 發(fā)布時間:2024-06-09

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標本各30例,,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL,。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL,。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時,過濾,,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織,。天津品質好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

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試劑盒:JC-1是一種陽離子脂質熒光染料,,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級,,有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性,。原理:JC-1染料在正常細胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),形成多聚體,,發(fā)紅色熒光,;而在凋亡細胞內(nèi),由于線粒體膜電位的破壞,,不能聚集到線粒體內(nèi),,以單體的形式存在于胞質內(nèi)發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),,在低濃度時以單體的形式存在,,高濃度時以多聚體形式存在,,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,,JC-1可透過正常細胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),。上海提供糖原染色試劑盒利用化學試劑與細胞內(nèi)的某些物質進行化學反應。

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PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應,,有時陽性反應幼紅細胞的百分比增高,,陽性反應的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應,。②缺鐵性貧血,、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比也較高,。有時紅細胞也可呈陽性反應,。③巨幼細胞性貧血、溶血性貧血,、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,,幼紅細胞為陰性反應,有時*個別幼紅細胞呈陽性反應

糖原及粘液染色法注意事項:1,、糖原的固定要及時,,而且標本要新鮮。2,、如用無水酒精作糖原的固定劑,,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是。4,、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時可考慮適當?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號,,其效果就可能不同,應特別引起注意,。將動物殺死后迅速取出所需要的組織,。

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糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,,主要用來檢測組織中的糖類,。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色,。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,,糖原染色,。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,,再與Schiff氏液的無色品紅結合,,紅色,定位于胞漿上,。3,、應用隨著醫(yī)學實驗技術的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加普遍,,如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質,,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等。通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學成分進行定性,、定位,、定量研究。上海提供糖原染色試劑盒

對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性,。天津品質好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)

糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應積分正常人幼紅細胞PAS反應積分[臨床意義]惡性淋巴瘤,、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血,、再障貧血時幼紅細胞PAS反應多為陰性紅血病,、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞PAS反應積分可40甚至高達100--200以上用于不典型巨核細胞與李-斯細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性后者為陰性或弱陽性,;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性而后者反應為陰性或弱性天津品質好的糖原染色試劑盒量大從優(yōu)