外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長,。據(jù)相關報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成,;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,,有研究發(fā)現(xiàn),,外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,,遷移能力,。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設備,,應用不普遍。外泌體提?。好芏忍荻入x心,。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體(Exosome)是細胞主動分泌的囊泡樣小體,大小均一,,直徑30-200nm,,密度1.10-1.18g/ml,來源普遍,,幾乎所有細胞都可分泌,,在血液,尿液,,唾液,,腦脊液,腹水,,乳汁等體液中普遍分布,。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中。1996年,,研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應,,開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學獎解答了細胞如何組織其內(nèi)部較重要的運輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘,。超離法因操作簡單,,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受?歡迎,但過程比較費時,,且回收率不穩(wěn)定,,純度也受到質(zhì)疑。南京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家外泌體提?。盒》肿涌蛇M入凝膠中絕大部分孔洞,,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出,。
由于這些核酸被囊膜包裹而被保護,,穩(wěn)定性高,,不易降解,是一種用于一些病癥診斷和預后監(jiān)測的非常理想的新型生物標記物一些疾病的早期診斷,、用藥監(jiān)控、預后判斷,。近年來,,隨著人們對外泌體的研究和認識加深,外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術(shù)已被許多臨床科研機構(gòu)普遍地應用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷,、治病和監(jiān)測,;如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應用的關鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液,、血液,、唾液、腹水,、胸腹水等)和細胞液中快速提取的,,其是活細胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA,、RNA,、以及miRNA),在體內(nèi)細胞間物質(zhì)和信號轉(zhuǎn)導中起到重要作用,。
外泌體相關蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來眾多文獻報道,,肺病細胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進肺病的發(fā)生的發(fā)展,是早期診斷肺病的有效途徑,。有研究發(fā)現(xiàn),,NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,,因而認為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標志物,。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),進一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號傳導途徑以促進一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學標記物,。近幾年來,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,。外泌體的提取方法:色譜法,。
外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,,內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA,、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN**段等多種物質(zhì),存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,,雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”,所以才被排出來,,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞,。如今,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用。專利申請利用分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基來進行體外培養(yǎng),。外泌體提?。撼x法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,。南京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家
外泌體提?。涸诔匐x心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應用潛能):外泌體生成機制表明,,通過分析外泌體的組分,可以幫助識別其來源的細胞類型,。這一特性已被應用于開發(fā)心血管疾病,,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關疾病中進行研發(fā)測試,。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,,使外泌體懸浮于液體上層。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
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