PAS染色的臨床意義:1.紅細胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比增高,,陽性反應的程度也很強。有時紅細胞也呈陽性反應,。②缺鐵性貧血,、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞可呈陽性反應,有時陽性反應幼紅細胞的百分比也較高,。有時紅細胞也可呈陽性反應,。③巨幼細胞性貧血,、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,,幼紅細胞為陰性反應,,有時個別幼紅細胞呈陽性反應糖原的固定要及時,而且標本要新鮮,。天津提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料,。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL,、甲醛10mL,。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL,。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,,過濾,,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h北京口碑好的糖原染色試劑盒進貨價過碘酸氧化時間不宜過久,,氧化時的溫度以18~22℃佳,。
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應,胞漿呈紅色,陰性反應,胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色,;PLT染成深紅色,;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒,;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒,;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色,;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關
糖原染色:細胞內(nèi)含1,2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基,,與特殊染液作用,,使無色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質(zhì)之中,。紅色的深淺與細胞中起反應的1,,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細胞與李—斯細胞的鑒別,,前者PAS反應為強陽性,,后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別,,前者PAS反應為強陽性,,而后者反應為陰性或弱性。正常值正常情況下,,紅細胞系統(tǒng)的原,、幼紅細胞和成熟紅細胞;粒細胞系統(tǒng)的原粒細胞,、原單核細胞和大多數(shù)淋巴細胞為陰性反應,。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,,切片不能太厚。
試劑盒:JC-1是一種陽離子脂質(zhì)熒光染料,,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑,。JC-10染料是JC-1染料的升級,有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性,。原理:JC-1染料在正常細胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),,形成多聚體,發(fā)紅色熒光,;而在凋亡細胞內(nèi),,由于線粒體膜電位的破壞,不能聚集到線粒體內(nèi),,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時以單體的形式存在,高濃度時以多聚體形式存在,,兩者的發(fā)射光譜不同,,但均可在流式細胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,JC-1可透過正常細胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),。在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織,。江西品質(zhì)好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部,。天津提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
彈力染色應用:(1)動靜脈的辨認:在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認時,,彈力纖維染色有助于辨認。有彈力板者為動脈,,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管,。彈力纖維抗損傷能力較強,故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞,。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生,,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生,。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫,、、大動脈中層炎癥等,,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷,。天津提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨