一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點:1,、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率,,同時避開了使用其他設(shè)備帶來的成本上升問題。2,、本發(fā)明專利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿),,其動物實驗表明其具有非常好的止血效果,。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血。具有廣闊的應(yīng)用前景。3,、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,,與出血創(chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血創(chuàng)面上,,外面則形成連續(xù)的壓迫干層,。啟動凝血因子。同時,,聚乙烯醇為成膜材料,,兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上,, pH 左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,。昆明鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原:1實驗制備:實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平,、生理鹽水,、75%酒精、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶、鉆石筆,、鼠尾膠原,。實驗內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作),。2,、切割小玻片。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。實驗步驟:制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,;3、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,;4、重復(fù)步驟2,、3,,直至尾腱量夠用;5,、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克)。天津正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌,、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),,雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,,這時候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。膠原蛋白就像骨骼中的一張充滿小洞的網(wǎng),,它會牢牢地留住就要流失的鈣質(zhì),。
鼠尾膠原,10mg包裝,,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml,。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,容量瓶配制比較準(zhǔn)確,。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,,吸十次不如加一次z準(zhǔn)確),加入盛膠原的瓶中,,輕輕顛倒,,不要震蕩,蛋白容易起泡,。幾分鐘即可,,蛋白質(zhì)非常好溶解,。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,,比青霉素瓶大點的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,,打到一檔就行,,避免加入氣泡。然后4度過夜除菌,。4.第二天將上層膠原溶液分裝進(jìn)EP管中,。用封口膜封口,4度保存,,勿冷凍,。開蓋在超凈臺上過夜晾干,,也可以在室溫放置1小時后。合肥天津鼠尾膠原
鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗長時程的記錄,。昆明鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。昆明鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨