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鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥,。它還可以用來制造一種凝膠,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基,。此外,,還可以把它當(dāng)膠水使用。在化妝品行業(yè),,鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠,。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜。不過,,用于撫紋,,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取,。不過,,用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從?;蜇i提取,。鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立。青島正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié),。目前,,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植,。其中,,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機(jī)礦物材料[1-2],,由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織,。但是,,自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,,數(shù)量有限,難以滿足臨床需要,。因此,,研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo),。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,,在分子結(jié)構(gòu)上,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,,沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu),,酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,,重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維,然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化,,通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。武漢鼠尾膠原廠家直銷一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,。
詳細(xì)步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開,、去掉皮毛,,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵,;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,,并不時(shí)振蕩,;4.48h后取上清,4000轉(zhuǎn)離心30min后,,取上清,;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存。有時(shí)可繼續(xù)向4,。中沉淀中加入10-20ml醋酸,,重復(fù)以上步驟,以制備更多的鼠尾膠,。在使用時(shí),,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,,再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液,。2)若包被的是培養(yǎng)瓶,,可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內(nèi)后,,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞,。若為培養(yǎng)皿或板的話,可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi),,將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),,蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死,。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉。鼠尾膠原蛋白的用途是什么:顧名思義,,鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì),。
使用方法:1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開蓋在超凈臺上過夜晾干,,也可以在室溫放置1小時(shí)后,用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間,。2、三維膠原凝膠的制備:A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測定pH值)。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),。徐州鄭州鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,,可用于化妝品,工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域,。青島正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。青島正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家