外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,,直徑約為30-200nm,,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),,天然存在于血液,、尿液,、唾液,、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞),都可以產(chǎn)生并釋放exosome,。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,,Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì),、mRNA,、miRNA、lncRNA,、circRNA,,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,參與細(xì)胞間通訊,。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng)、血管生成,、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用,不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,,也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病由于國內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏,,我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進(jìn)口提取試劑盒。徐州外泌體提取試劑直銷廠家
外泌體(exosomes)是活細(xì)胞經(jīng)過"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過程而形成的膜性囊泡,,來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),,直徑約為30-150nm,密度在1.13-1.21g/ml,,天然存在于血液,、唾液、尿液及母乳等體液中,,同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,人體中大約有1014個(gè)外泌體,,大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸(DNA、miRNA,、lncRNA、mRNA,、tRF等),、蛋白和脂類,在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,,研究表明其在干細(xì)胞,、免疫調(diào)控、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用金華外泌體提取試劑單價(jià)外泌體提?。撼叽缗抛枭V可以精確分離大小分子。
外泌體的提取方法:1.超速離心法(差速離心),。超離法是較常用的外泌體純化手段,,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,,可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,,但過程比較費(fèi)時(shí),,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑,;此外,,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2.密度梯度離心,。在超速離心力作用下,,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法,。通過密度梯度離心,,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,,但步驟繁瑣,,耗時(shí),對離心時(shí)間極為敏感,。
作為一種分子通斷開關(guān)的KRAS發(fā)生突變時(shí)會處于“開啟”狀態(tài),。在80%~95%的胰腺導(dǎo)管腺病(PDAC)當(dāng)中,,這個(gè)基因發(fā)生突變,,這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實(shí)iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,,并且比他們的合成對應(yīng)物脂質(zhì)體(liposome)更加高效,。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說,,“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,,外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力。我們也證實(shí)外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細(xì)胞的吞噬作用,?!眮碓从诩?xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。
外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,,可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,,其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN段等多種物質(zhì),存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,,雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”,,所以才被排出來,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今,,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。外泌體提取:樣本的粘度與分離的外泌體純度有顯著的相關(guān)性,。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格
外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:樣本輸入量多樣,。徐州外泌體提取試劑直銷廠家
外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心),。超離法是常用的外泌體純化手段,,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行(如圖所示),,可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,,但過程比較費(fèi)時(shí),,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑,;此外,,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量,。2、密度梯度離心,。在超速離心力作用下,,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法,。通過密度梯度離心,,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,,但步驟繁瑣,,耗時(shí)。徐州外泌體提取試劑直銷廠家