外泌體(exosome),,特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞,、瘤細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞,、瘤的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí),,不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,,包括外泌體,、微泡和凋亡小體。超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,,可分離到大小相近的囊泡顆粒。南昌正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,,進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA,。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑哪里買(mǎi)可將外泌體吸附并分離出來(lái),。
外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):純化和富集的完整血漿/血清,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,;樣本輸入量多樣,;無(wú)需耗時(shí)的超速離心,過(guò)濾或特殊注射器,;無(wú)需沉淀試劑,,也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng);無(wú)需蛋白酶處理,;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白;可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,,以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中,,攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子,,形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。
外泌體的提取,、分離方法:聚合物沉淀法,。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,近幾年,,將其作為一種新的方法來(lái)分離外泌體,。目前,市場(chǎng)已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,,較常見(jiàn)的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,,該試劑盒操作簡(jiǎn)單不需要特殊的儀器,但是價(jià)格昂貴,。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過(guò)夜,,之后再低速離心。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠,、超濾、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。
外泌體,,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白,、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣,。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,,如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。首先在無(wú)菌條件下提取人體體液,,并用PBS緩沖液進(jìn)行稀釋。杭州正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
外泌體提?。撼x法是較常用的外泌體純化手段,,采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行。南昌正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)
外泌體(exosomes,,Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡,,因其可以將供體細(xì)胞的信息通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞,,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1),。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,使其可以穿透許多生物膜,,提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性,,可以穩(wěn)定存在于血液中,納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR),。目前,,許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒(méi)有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,,使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。南昌正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)