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外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈,、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來(lái)源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,,促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲。功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,,如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸,、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能,。外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)
外泌體的形成與鑒定:首先,細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu),,包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,,ESE)的從頭形成,,或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合;trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs,。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,,LSEs),較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體),。MVBs是通過(guò)endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,,這一過(guò)程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合,,較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白,、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白、細(xì)胞內(nèi)蛋白,、RNA,、DNA、氨基酸和代謝物,。使用可截留100KD分子量的膜,,通過(guò)離心截留上清中的外泌體,,截留完成后廣州正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),。
這一特性已被應(yīng)用于開(kāi)發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測(cè)試,。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層,,外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測(cè)到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測(cè)到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測(cè)到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,,通過(guò)分析外泌體的組分,可以幫助識(shí)別其來(lái)源的細(xì)胞類型,。
外泌體的提取、分離方法:免疫親和層析法,。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法,主要用于生物大分子的分離,、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體,如TSG101或四跨膜蛋白,。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,,只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,這使得提取的外泌體純度高,,但是產(chǎn)量低,。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,,從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白,,結(jié)果表明,免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix,、CD9,、CD63),同時(shí),ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性,。同時(shí)可獲得高純度和高回收率的外泌體——如新西蘭IZON開(kāi)發(fā)的系列的外泌體排阻劑,。
外泌體(exosomes)是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡,來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),,直徑約為30-150nm,,密度在1.13-1.21g/ml,天然存在于血液,、唾液,、尿液及母乳等體液中,同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,,人體中大約有1014個(gè)外泌體,大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸(DNA,、miRNA、lncRNA,、mRNA,、tRF等)、蛋白和脂類,,在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,,研究表明其在干細(xì)胞、免疫調(diào)控,、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用外泌體提取:超離法是較常用的外泌體純化手段,,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行,。武漢正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格
外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)
1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液、唾液、尿液,、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),,無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā),。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵長(zhǎng)沙外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)