外泌體(exosomes,,Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細(xì)胞的信息通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞,,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,,并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,,使其可以穿透許多生物膜,提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性,,可以穩(wěn)定存在于血液中,,納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,,許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒(méi)有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,,使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。外泌體:形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),,影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān),。成都外泌體提取試劑供應(yīng)商
外泌體作為近幾年來(lái)的研究熱點(diǎn),受到了科研工作者的青睞及追捧,。由于外泌體內(nèi)攜帶有大量的miRNA,少量lncRNA,Mrna以及DNA蛋白質(zhì)成為液體活檢的潛力無(wú)限的研究對(duì)相,。所以,獲得純度高,、內(nèi)容物完整的外泌體非常之重要,,那么,外泌體的提取方法也顯得尤為重要,。一,、差速離心法差速離心法可以說(shuō)是傳統(tǒng)普遍的外泌體提取方法。原理是:首先低速離心以除去細(xì)胞和細(xì)胞凋亡碎片;隨后,,高速離心以去除大囊泡,;高速離心以沉淀外泌體。蘇州君欣生物科技有限公司鄭州正規(guī)外泌體提取試劑廠家外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等,。
CD47是信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,也稱為CD172a)的配體,,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號(hào),,從而壓制吞噬作用。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,,增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體,。合成納米顆粒對(duì)細(xì)胞有一定毒性作用,但使用外泌體能夠較小化對(duì)細(xì)胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),,CD47和病基因KRAS驅(qū)動(dòng)的胞飲作用都會(huì)壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對(duì)外泌體的特異性,。所以,,外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過(guò)遞送RNAi來(lái)特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期,。
外泌體,,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,,如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體的提取方法:磁珠免疫法,。
所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),,無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。超離法是較常用的外泌體純化手段,,采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,可分離到大小相近的囊泡顆粒,。廈門(mén)正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)
目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。成都外泌體提取試劑供應(yīng)商
有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機(jī)器,,耗費(fèi)近24小時(shí)的時(shí)間才能獲得,,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡,。降低樣品的質(zhì)量。這項(xiàng)研究有望解決這一難題,。在論文中,,研究人員們提供了一種通過(guò)微流體和聲學(xué)的獨(dú)特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開(kāi)發(fā)的原始聲學(xué)分選裝置由兩個(gè)傾斜的聲學(xué)換能器和一個(gè)微流體通道組成,,當(dāng)這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時(shí),,形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點(diǎn)的駐波。每當(dāng)細(xì)胞或顆粒流過(guò)通道并遇到一個(gè)節(jié)點(diǎn)時(shí),,壓力會(huì)將細(xì)胞引導(dǎo)離開(kāi)中心一點(diǎn)點(diǎn),。細(xì)胞移動(dòng)的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),,這樣,當(dāng)?shù)竭_(dá)通道末尾時(shí),,不同大小和性質(zhì)的細(xì)胞就能夠被分離開(kāi)來(lái),。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,,為開(kāi)發(fā)評(píng)估人類健康以及疾病診斷和進(jìn)展提供了有吸引力的新方法,。成都外泌體提取試劑供應(yīng)商