外泌體的提取,、分離方法：梯度密度離心法,。研究發(fā)現(xiàn)，外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間,，因此,，可以采用密度梯度離心法來分離外泌體,。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合，原理是先除去非囊泡物質(zhì),，再通過梯度密度濃縮提取外泌體,，該方法可以得到相對較為純凈的外泌體,。傳統(tǒng)的梯度密度方法通常需要離心16h，但是2012年,，研究者[15]使用了62~90h才分離出某些確切囊泡,，因此，該方法可能不足以沉淀所有的外泌體,。如果離心時(shí)間不充足,，污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層，特別是這個(gè)密度范圍又比較寬,。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高,。重慶外泌體提取試劑服務(wù)電話

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等。關(guān)于外泌體的提取有超速離心,、試劑盒,、超濾法、蔗糖密度梯度離心等,，然而各種方法均有其利弊,。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣,，費(fèi)事費(fèi)力,，而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染，且損耗量大,，使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定,。而且對于抽提細(xì)胞上清來說，更是極為不請便,，試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管,，無論是過濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點(diǎn),，總之非常麻煩,。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔,，造成濃縮效率低,，濃縮管重復(fù)利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán),，造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差,，對于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響。太原外泌體提取試劑報(bào)價(jià)外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等,。

外泌體的提取,、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”,。該方法利用離心力從細(xì)胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體，經(jīng)過400×g,、2000×g,、10000×g的低速離心，除去細(xì)胞及大的細(xì)胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12],。超高速離心因操作簡單，不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,，并且成本相對較低而被普遍使用,。但是該方法耗時(shí)、產(chǎn)率低,，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型,、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,，但也會(huì)有其他的囊泡,、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。

外泌體鑒定：參與生物功能的分子,，如凋亡轉(zhuǎn)接基因2互作蛋白X（ALIX）,、一些病癥易感基因101蛋白（TSG101）、熱休克蛋白（HSP70,、HSP90）,，以及細(xì)胞分泌的特異性蛋白。外泌體高通量檢測,。外泌體內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)和核酸,，可以運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA,、miRNA,、lncRNA、circRNA等進(jìn)入受體細(xì)胞,，參與細(xì)胞間通訊,。不同細(xì)胞來源的外泌體所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病治病,。高通量測序。2.mRNA高通量測序。芯片（人,、小鼠）,。芯片（人、小鼠）,。5.蛋白質(zhì)組分析（iTRAQ,、TMT、Label-free）,。機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。

外泌體,，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白,、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對細(xì)胞分泌膜泡的興趣,。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移,、組織損傷的修復(fù)等。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。武漢外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

逐漸取代超速離心法并推廣開來,。有些試劑盒操作簡便,，不用超速離心。重慶外泌體提取試劑服務(wù)電話

外泌體的提取,、分離方法：聚合物沉淀法,。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年,，將其作為一種新的方法來分離外泌體,。目前，市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,，該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,，但是價(jià)格昂貴,。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,，之后再低速離心。重慶外泌體提取試劑服務(wù)電話