細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,，減少細(xì)胞代謝,，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,，起到了細(xì)胞保種的作用,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，利用凍存技術(shù)可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗,。目前現(xiàn)有技術(shù)中，細(xì)胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO),、20％～90％胎牛血清(FBS),、剩余組分為完全培養(yǎng)基。培養(yǎng)基以及FBS可為細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)物質(zhì),。DMSO是一種滲透性保護劑,，能夠降低細(xì)胞冰點，減少冰晶的形成,，從而達到降低細(xì)胞損傷的保護效果,。但FBS屬于動物源性物質(zhì)，成分比較復(fù)雜,，在臨床應(yīng)用上存在潛在的風(fēng)險,，也增加了污染的幾率，并且由于凍存液中含有動物血清,，會導(dǎo)致凍存液的成分存在不穩(wěn)定的因素,。在凍存細(xì)胞時將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低,，提高細(xì)胞膜對水的通透性,。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項：DMSO快速稀釋會對細(xì)胞造成滲透性損傷,，使存活率下降50%,。對于DMSO凍存的細(xì)胞，復(fù)蘇后應(yīng)緩慢稀釋成細(xì)胞懸液：1）凍存液：培養(yǎng)基=1:1稀釋成細(xì)胞懸液后離心,，然后重懸至培養(yǎng)皿中培養(yǎng),，隔天換液；2）凍存液：培養(yǎng)基=1:10稀釋成細(xì)胞懸液,，不用離心,，直接放置到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-4小時后,，換液。上述兩種方法都是比較常用的細(xì)胞復(fù)蘇方法,，后者更適用于原代細(xì)胞或比較難養(yǎng)的細(xì)胞,。液氮內(nèi)的細(xì)胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細(xì)胞應(yīng)一段時間內(nèi)進行更替,。一個細(xì)胞系在培養(yǎng)一個月后,，可復(fù)蘇一管新的細(xì)胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化，傳代幾次后,，再凍存留種,。溫州重慶無血清細(xì)胞凍存液無血清凍存液特性：不需回溫，完全即用型,。

無血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對比：傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%,，血清的含量是10%,，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜）,，較后才移至液氮罐中進行長期的儲存,。可見,，含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時遇到的問題：1.凍存細(xì)胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣，耗時耗力,。3.含血清,，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高,。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,，且不能原位（如孔板）凍存,。

無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品用途：1.無血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存,。2.無血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。3.無血清細(xì)胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品原理：無血清細(xì)胞凍存液,，含多種保護劑成分,。一些保護劑，易于穿透細(xì)胞,，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,，同時另一些保護劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前,，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細(xì)胞的數(shù)量,，無血清細(xì)胞凍存液,，為多種保護劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進行雙重保護,，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：即用型，無需現(xiàn)配,，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可,。

細(xì)胞凍存的注意事項：1、各種細(xì)胞對凍存速度的要求也不一樣,；上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些,，骨髓干細(xì)胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細(xì)胞耐受性較小,，不宜太快,。總之在一開始時,，下降速度不能超過－10℃/分鐘,。2、用什么防護劑合適和用量多大,，要依細(xì)胞而定,，初代培養(yǎng)細(xì)胞用DMSO較好，一般細(xì)胞可用甘油,；用量以較小為好,。有人認(rèn)為人皮膚上皮細(xì)胞貯存在20%-30%甘油中很好。3,、原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年,，但為妥善起見，凍存一年后,，應(yīng)再復(fù)蘇培養(yǎng)一次,，然后再繼續(xù)凍存,。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,，要做好防護工作,，以免凍壞。5,、注意自身的安全,，對于來自人源性或病毒傳染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心。操作過程中,，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,，小心有毒性試劑例如DMSO，并避免尖銳物品傷人等,。無血清細(xì)胞凍存液使用方法：按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中,。上海無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商

根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話

含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時遇到的問題：1.凍存細(xì)胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,，此步可省略),。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣,，耗時耗力,。3.含血清，細(xì)胞污染(細(xì)菌,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高,。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存,，且不能原位（如孔板）凍存。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,，含DMSO,、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液,。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是：將細(xì)胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長期保存。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話