細胞凍存和復蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力,。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,，PH,，電解質(zhì)等的改變,，進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,，添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液.細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,，在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,，而且細胞一旦開始原代培養(yǎng),，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要,。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,；細胞儲存在液氮中，溫度達-196℃,，理論上儲存時間是無限的,。度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中。鄭州無血清細胞凍存液報價

無血清細胞凍存液,，通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規(guī)細胞）,，凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CellFreezingMedium配方成分明確,，不含動物來源性蛋白,，Chemicalbook不含血清，可減少各類細菌,、病毒和支原體等污染,，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，提高細胞存活率和活力,，亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。細胞凍存是細胞實驗中的一個常規(guī)技術，通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,，由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風險Chemicalbook,，故傳統(tǒng)的細胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究。本產(chǎn)品完全由化學成分組成,，無動物來源,，目前測試可以很好的凍存T細胞，NK細胞以及MSC等細胞,。南昌正規(guī)無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：即用型,，無需現(xiàn)配，即開即用,。

無血清細胞凍存液：凍存注意：開蓋之前,，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身,。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應該在適合傳代的時候進行收集和凍存,。每管所含有的細胞應當來源于6孔板的1個培養(yǎng)孔,。如果使用其他的培養(yǎng)器皿，請相應的調(diào)整體積,。1.在室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘,。2.輕輕吸走上清液，注意不要擾動細胞團,。3.用血清學吸管以1mL的TBD-698重懸細胞,。在打散細胞團時，盡量減少細胞聚集體分解,。4.用2mL的血清學吸管將1mL的細胞聚集體轉移到標記好的凍存管中,。5.用以下方法凍存細胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法，每分鐘降低1度,，隨后可以在-196°C液氮長期保存,。不推薦在-80°C長期保存。逐步降溫法：-20°C保存2個小時,，然后-80°C中保存2個小時,，隨后可以在-196°C液氮中長期保存。

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗,。而且適度地保存一定量的細胞,，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用,。除此之外,，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈,、交換和運送某些細胞,。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低,，加之在緩慢凍結條件下,，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成,，從而避免細胞損傷,。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速,，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃),。無血清凍存液特性：不含動物成分。

無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優(yōu)勢：傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%,，統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液,。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），較后才移至液氮罐中進行長期的儲存,。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡,。）反復吹吸混勻后,，分裝于細胞凍存管中，每管500ul-1000ul,。溫州正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家

含血清,，細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高,。鄭州無血清細胞凍存液報價

無血清細胞凍存液的操作規(guī)范：1,、培養(yǎng)細胞至對數(shù)生長晚期，顯微鏡觀察其外觀,、形態(tài),、有無污染等。選擇狀態(tài)良好的細胞進行凍存操作(注：貼壁生長細胞,，用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化,，進行細胞計數(shù);懸浮生長細胞，進行細胞計數(shù)),。2、500～1000g離心5min,，棄上清,。3、加入適量的細胞凍存液,，重懸細胞,，使細胞濃度達到1～10×106/ml，置于凍存管中密閉。4,、采取逐級降溫保存：4℃放置20min,，-20℃放置30min，-70℃過夜,，置于液氮罐中長期存儲,。注意：務必超凈工作臺內(nèi)無菌操作，避免污染,。雜交瘤細胞凍存時應定期復蘇,，以檢查細胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。鄭州無血清細胞凍存液報價