外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清,，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣,；無(wú)需耗時(shí)的超速離心,，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑,，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng),；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種,；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,；可以使用NanoSight®或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子,，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)近年來(lái)，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,。珠海外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體（exosome）,，特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、樹(shù)突狀細(xì)胞,、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等,。外泌體在免疫中抗原呈遞,、瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。同時(shí),，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,，包括外泌體、微泡和凋亡小體。寧波外泌體提取試劑廠家推薦外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊,。

外泌體的形成與鑒定：首先，細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu),，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,，導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成,，或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合,；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,，LSEs),，較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體)。MVBs是通過(guò)endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,，這一過(guò)程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs,。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜,，通過(guò)離心截留上清中的外泌體,，截留完成后

為了分離外泌體，研究人員用兩個(gè)這樣的單元串聯(lián)構(gòu)建了一個(gè)裝置,。首先,，使用聲波從血液樣品中除去細(xì)胞和血小板。一旦細(xì)胞和血小板被去除,，樣品進(jìn)入第二個(gè)微流體單元,，然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細(xì)胞外囊泡分開(kāi)。這項(xiàng)工作的通訊作者之一,，麻省理工學(xué)院材料科學(xué)與工程系科學(xué)家MingDao博士說(shuō)：“聲波更溫和,。而且在分離時(shí)，這些囊泡受處理的時(shí)間只有1秒鐘或更短,。這是一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì)。”使用該設(shè)備,，處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘,。“這種新技術(shù)可以解決當(dāng)前外泌體分離技術(shù)的缺點(diǎn),，如周期長(zhǎng),，一致性差，產(chǎn)量低,，污染以及完整性受損等,。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過(guò)程簡(jiǎn)化為按一個(gè)按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡(jiǎn)單?！毖芯咳藛T們說(shuō),。來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高,、操作難度大,。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理,，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液,、腹水、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取,，并搭配純化過(guò)濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí),，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清,、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí),，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心,。3.針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進(jìn)行Westernblot檢測(cè)，可以鑒定所提的外泌體,。通過(guò)超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量,。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成。唐山正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)

靜置10～15分鐘,，留取沉淀物備用,。珠海外泌體提取試劑廠家直銷

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉(zhuǎn)子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉(zhuǎn)子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來(lái)自2×107個(gè)細(xì)胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過(guò)濾膜除菌后凍存于-80℃?zhèn)溆谩＃ㄔ摬襟E參考文獻(xiàn)“腫瘤細(xì)胞來(lái)源胞外體的分離鑒定與功能檢測(cè)”）優(yōu)點(diǎn)是：分離得到的外泌體純度很高,。缺點(diǎn)是：步驟繁瑣,、耗時(shí)耗力、對(duì)離心時(shí)不好把握,。珠海外泌體提取試劑廠家直銷