無(wú)血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對(duì)比:細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法,,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液,,不光光是說(shuō)只是用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的保存,,在細(xì)胞的購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過(guò)程中也起著關(guān)鍵作用,,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要,。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷,、電解質(zhì)升高、滲透壓改變,、脫水,、pH值改變、蛋白變性等,,從而引起細(xì)胞死亡,。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中,,可使冰點(diǎn)降低,,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,在緩慢的凍結(jié)條件下,,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,,可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),,在需要時(shí)直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性,。凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年,。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)
無(wú)血清細(xì)胞凍存液復(fù)蘇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻,。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,3~5min),,移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液,。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。貴陽(yáng)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨無(wú)血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存。
細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,,4℃預(yù)冷(新鮮配制的凍存液會(huì)產(chǎn)生大量的熱),;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,用細(xì)胞消化酶將單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái),;懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中,;離心1200rpm,6min,;去除上清液,,逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,,計(jì)數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,,每管1~1.5ml,;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時(shí)間及操作人員姓名,;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;到達(dá)-80℃時(shí),,則可迅速放入液氮中,。
細(xì)胞凍存的基本原理:細(xì)胞代謝過(guò)程需要各種蛋白酶的參與,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作,,低溫貯藏的目的是通過(guò)較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止,。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài),使細(xì)胞“不會(huì)老”,,所以可以長(zhǎng)期保存,。因?yàn)閮鋈谶^(guò)程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的,因此,,需要開發(fā)出有效的技術(shù)來(lái)防止細(xì)胞死亡和損傷,。低溫保護(hù)劑可保護(hù)細(xì)胞不受細(xì)胞內(nèi)冰凍影響,目前多采用DMSO,,甘油,,乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護(hù)劑。它們的作用機(jī)制包括:自由進(jìn)入細(xì)胞,,取代水,,使冰點(diǎn)下降,充當(dāng)鹽的二次溶劑,,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:即用型,無(wú)需現(xiàn)配,即開即用,。
含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),,步驟繁瑣,,耗時(shí)耗力。3.含血清,,細(xì)胞污染(細(xì)菌,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存,。Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,,含DMSO、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液,。Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是:將細(xì)胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,2-8℃保存即可,,無(wú)需再進(jìn)行分裝。無(wú)錫無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨
無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存液成分,。無(wú)血清細(xì)胞,無(wú)血清干細(xì)胞及MSC凍存液,。保存條件:儲(chǔ)存于4℃以下,。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年,。3個(gè)月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時(shí),,盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,,平均活細(xì)胞回收比例超過(guò)80%。與含血清凍存液比較,,BI無(wú)血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,,BI無(wú)血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存,。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)