外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。成都外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來(lái),，高通量質(zhì)譜分析被普遍地應(yīng)用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標(biāo)志物價(jià)值的分子,。Birgitte等采用微陣列芯片技術(shù)研究了431例肺病患者和150例對(duì)照者血漿外泌體中的蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CD151,、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達(dá)不光能區(qū)分一些病癥與正常組織，同時(shí)也能區(qū)分各種肺病的組織亞型,。此外，聯(lián)合應(yīng)用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達(dá)到0.74,。Clark等采用納升液聯(lián)用技術(shù)（nano-ESI-LC-MS/MS）分析了來(lái)自正常支氣管上皮細(xì)胞系和兩個(gè)攜帶NSCLC細(xì)胞系的外泌體的蛋白表達(dá)譜，從中篩選出如細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子,、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達(dá)的蛋白,，同時(shí)檢測(cè)分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性,。由于國(guó)內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏，我國(guó)對(duì)外泌體的研究還基本依賴(lài)于過(guò)程繁瑣的超速離心和進(jìn)口提取試劑盒,。成都外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)近年來(lái),，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,。

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體（LCC-exosome）可以通過(guò)刺激一些病癥血管的形成來(lái)促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng),。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱(chēng)，LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,，促進(jìn)一些病癥血管的生成,；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用。此外,，有研究發(fā)現(xiàn),，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力,。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用,。

1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類(lèi)似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle）,，所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì),。隨著有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多,，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞,、細(xì)胞分化,、一些病癥生長(zhǎng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,，外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷,，形成內(nèi)體（endosome）,，再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB）,，較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類(lèi),、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見(jiàn)于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,，并命名為exosome,。對(duì)于外泌體的作用，當(dāng)時(shí)推測(cè)為細(xì)胞排泄廢物的一種方式,。超離法是常用的外泌體純化手段,，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒。深圳正規(guī)外泌體提取試劑

超濾離心法簡(jiǎn)單高效,，且不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不高的問(wèn)題。成都外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)

所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊,，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),，無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。成都外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)