外泌體的提取分離：1、PEG-base沉淀法。聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。2、試劑盒提取,。近幾年來(lái),，市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過(guò)特殊設(shè)計(jì)的過(guò)濾器過(guò)濾掉雜質(zhì)成分,，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來(lái)。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,，提取效率和純化效果逐漸提高,，因而逐漸取代超速離心法并推廣開(kāi)來(lái)。有些試劑盒操作簡(jiǎn)便,，不用超速離心,，同時(shí)可獲得高純度和高回收率的外泌體。重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量,。天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽(yù)為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。該方法利用離心力從細(xì)胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體,，經(jīng)過(guò)400×g,、2000×g、10000×g的低速離心,，除去細(xì)胞及大的細(xì)胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡(jiǎn)單,，不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,，并且成本相對(duì)較低而被普遍使用。但是該方法耗時(shí),、產(chǎn)率低,，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類(lèi)型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,，其中較主要的問(wèn)題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,，但也會(huì)有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體,。珠海外泌體提取試劑供應(yīng)商外泌體提?。捍胖榉ň哂刑禺愋愿摺⒉僮骱?jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),。

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類(lèi)含有20～25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過(guò)下調(diào)或壓制靶mRNAs來(lái)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,，參與一些病癥的形成和演化過(guò)程。單個(gè)miRNA可能通過(guò)壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合,，從而阻滯整個(gè)生物通路,。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢(shì)。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),，與75例健康者相比,，發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對(duì)27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評(píng)估,，結(jié)果顯示,，12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過(guò)度表達(dá)。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,，發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA（miR-378a,、-379a、-139-5p,、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高,，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。離心除去細(xì)胞器,，留取上清,。

外泌體的提取、分離方法：微流控技術(shù),。微流控是利用微納米級(jí)尺寸的管道來(lái)處理和操控流體所涉及的一門(mén)技術(shù),，其在外泌體分離方面的應(yīng)用受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注。Jie等[16]課題組開(kāi)發(fā)了一種三維納米結(jié)構(gòu)微流控芯片,，微柱陣列通過(guò)化學(xué)沉積將交叉多壁碳納米管功能化,，然后其就可以識(shí)別特定的分子(CD63)并利用獨(dú)特拓?fù)浼{米材料高效的捕獲外泌體。Wunsch等[17]利用硅工藝生產(chǎn)納米級(jí)確定性側(cè)向位移(Nano-DLD)芯片,，得到了均勻的間隙尺寸,，該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離。該研究證明了外泌體基于大小的位移,，從而揭示了利用芯片分選和量化納米級(jí)生物膠體的潛力,。超濾離心法簡(jiǎn)單高效，且不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不高的問(wèn)題,。

外泌體（exosomes）是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡，來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱(chēng)為多囊泡體),，直徑約為30-150nm,，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液,、唾液、尿液及母乳等體液中,，同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體，人體中大約有1014個(gè)外泌體，大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸（DNA,、miRNA、lncRNA,、mRNA,、tRF等）、蛋白和脂類(lèi),，在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,，研究表明其在干細(xì)胞、免疫調(diào)控,、瘤轉(zhuǎn)移,、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用。一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),。長(zhǎng)沙外泌體提取試劑供應(yīng)商

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：樣本輸入量多樣,。天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具，可以通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖,，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移,。與細(xì)菌傳染，幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大,，并與心血管疾病,，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系。外泌體可通過(guò)流式,、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）,、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè),，普遍應(yīng)用于藥物載體,、疾病診斷marker、精細(xì)醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小，樣本含量低,，提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等。但到目前為止,，仍沒(méi)有一種提取方法能同時(shí)保證外泌體的含量,、純度以及生物活性。天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)