一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說(shuō)明書(shū)中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮、豬皮,、牛腱中提取,,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,;同時(shí),,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動(dòng)物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒,如果用此開(kāi)發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險(xiǎn)及危害,?!敝链耍氡亍昂淖游仓痹谥R(shí)產(chǎn)權(quán)界的名聲又亮了一些,。制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作),。合肥鼠尾膠原哪里買(mǎi)
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí),,前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,,不宜封接;有鼠尾膠原時(shí),,前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長(zhǎng)時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。深圳正規(guī)鼠尾膠原哪里買(mǎi)氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌。
膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹,、溶解,。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸,、磷酸,、硫酸、醋酸,、檸檬酸和甲酸等,。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu),。此法處理快速,,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,,但產(chǎn)品得率低,,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重,。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,,得到高純度的膠原蛋白溶液。
鼠尾膠原蛋白I型,,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。5.從包被表面除去多余的液體,。過(guò)夜干燥,。如果膠原溶液不是無(wú)菌的,這時(shí)候可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過(guò)夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,,成本低廉。制備鼠尾膠原:離心,,4000轉(zhuǎn)/分,,10-15分鐘。
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá),。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。北京正規(guī)鼠尾膠原服務(wù)電話
酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,。合肥鼠尾膠原哪里買(mǎi)
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。合肥鼠尾膠原哪里買(mǎi)