外泌體（exosomes）是活細(xì)胞經(jīng)過(guò)"內(nèi)吞-融合-外排"等一系列調(diào)控過(guò)程而形成的膜性囊泡,，來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體),，直徑約為30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml,，天然存在于血液,、唾液、尿液及母乳等體液中,，同時(shí)外泌體也存在于組織和細(xì)胞間隙中,。人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,，人體中大約有1014個(gè)外泌體，大約平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。外泌體中含有核酸（DNA,、miRNA、lncRNA,、mRNA、tRF等）,、蛋白和脂類,，在細(xì)胞間物質(zhì)和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用，研究表明其在干細(xì)胞,、免疫調(diào)控,、瘤轉(zhuǎn)移、血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域都發(fā)揮著不可替代的作用,。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高,。北京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí)，量少,。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷,。北京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng),。

這一特性已被應(yīng)用于開(kāi)發(fā)心血管疾病,，神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,，也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測(cè)試。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,，使外泌體懸浮于液體上層,，外泌體與神經(jīng)退行性疾病：外泌體可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測(cè)到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測(cè)到α-synuclein,，ALS病人外泌體中也可以檢測(cè)到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷（應(yīng)用潛能）：外泌體生成機(jī)制表明，通過(guò)分析外泌體的組分,，可以幫助識(shí)別其來(lái)源的細(xì)胞類型,。

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等,。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。同時(shí)，不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,，由多種細(xì)胞分泌,，內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì),、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì),。來(lái)源于不同的組織的外泌體不光具有其特異性蛋白分子,，而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子。外泌體的提取方法：密度梯度離心,。

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中,，一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng),；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化,，從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色,。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱，NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),。此外,，啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移,。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn),。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移，但也有報(bào)道稱,，外泌體miR-302b可以通過(guò)壓制TGFβRⅡ來(lái)壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖,。如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物。外泌體的提取方法：色譜法,。合肥正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家

也可以作為治病手段,，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。北京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的形成與鑒定：首先,，細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu),，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白，導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,，ESE)的從頭形成,，或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs,。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes,，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體),。MVBs是通過(guò)endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的,，這一過(guò)程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs,。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜,，通過(guò)離心截留上清中的外泌體,，截留完成后北京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家