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無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存,。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來(lái)源的血清成分,,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,,確保凍存細(xì)胞安全,,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。無(wú)血清凍存液使用方法:1,、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,,離心去除上清培養(yǎng)液。2,、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL,。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4,、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存,。5、儲(chǔ)存條件:2-8C保存,,年有效:-20C保存,,兩年有效。無(wú)血清細(xì)胞凍存液可用于造血干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存,。徐州無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢(shì):1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存,但并不適用于無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞,,例如一些CIK細(xì)胞等,,而無(wú)血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存,又適用于無(wú)血清細(xì)胞的凍存,,是一種通用型細(xì)胞凍存液,,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株;2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清,,因血清是動(dòng)物源性成份,,因此病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)很高,,而無(wú)血清細(xì)胞凍存液因不含血清,,只含DMSO、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成份,,較大降低了動(dòng)物血清來(lái)源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn),確保凍存細(xì)胞的安全,;3.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含血清,,但動(dòng)物血清成分復(fù)雜,個(gè)體差異大,,且生產(chǎn)來(lái)源不穩(wěn)定,,因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定,這導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)也會(huì)受到影響,,而無(wú)血清細(xì)胞凍存液成分和配比明確,,批次間差異很小,能夠保證生長(zhǎng)細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定性,,細(xì)胞存活率高,。昆明無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,。
新常態(tài)下細(xì)胞凍存指南:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍速融,,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。典型的細(xì)胞凍存液是在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,,或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些實(shí)驗(yàn)室中仍然采用這種自制自配的凍存液,,優(yōu)點(diǎn)是成本低,,適合自己的細(xì)胞。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液復(fù)蘇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,,3~5min),移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。隨著細(xì)胞治好以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力,。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,,電解質(zhì)等的改變,,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過(guò)程中,,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),,而且細(xì)胞一旦開(kāi)始原代培養(yǎng),,它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久,;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的,。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍,標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2/℃ min,。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液?jiǎn)蝺r(jià)
無(wú)血清凍存液用途:無(wú)血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ),。徐州無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),大部分的干細(xì)胞,,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存,。不含動(dòng)物源性蛋白,不含血清成分,,可有效減少各類細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全,。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1、無(wú)需程序性降溫,,可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,,凍存液無(wú)需稀釋。2,、細(xì)胞可于-80℃長(zhǎng)期保存,。3、凍存液不含血清等,,較大降低細(xì)胞污染的可能性,。保存方法:冰袋運(yùn)輸,4℃保存,,保質(zhì)期一年,。徐州無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家