所含化學(xué)成分明確,，無動物源性成分,，可一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞,。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率,。產(chǎn)品優(yōu)點1,、省去繁瑣的降溫步驟，可直接放置于-80°C冰箱,，節(jié)省時間和精力,。2、即用型,，無需現(xiàn)配,，操作方便，可減少實驗中因操作引起的污染,。3,、在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗證,，其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上。PH,，電解質(zhì)等的改變,，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,，4℃預(yù)冷（新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱）,；取對數(shù)生長期的細(xì)胞，用細(xì)胞消化酶將單層生長的細(xì)胞消化下來,；懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中,；離心1200rpm，6min,；去除上清液,，逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,，計數(shù),，調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細(xì)胞分裝入凍存管中,，每管1~1.5ml,；在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名,；凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min,；到達(dá)-80℃時，則可迅速放入液氮中,。深圳無血清細(xì)胞凍存液價格無血清細(xì)胞凍存液使用方法：加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,。

細(xì)胞凍存時間和操作步驟：1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,，通常細(xì)胞凍存液含10%的DMSO,，或者是甘油、10-20%的小牛血清,；,、取對數(shù)生長期細(xì)胞，并且還需要用PBS進(jìn)行清洗,，需要注意在這里要丟棄掉舊的細(xì)胞凍存液,；3.去除PBS，加入適量的胰蛋白酶,，以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,，然后把單層生長的細(xì)胞消化掉；然后離心1000rpm5min時間；4,、去除胰蛋白酶,，加入凍存培養(yǎng)液，輕輕吹打使細(xì)胞的分布變得均勻,，調(diào)節(jié)細(xì)胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml,，需要注意這是較佳的細(xì)胞密度；5,、將細(xì)胞裝入凍存管之中,，每管的含量應(yīng)該保持在1～1.5ml之間。在凍存管上標(biāo)明細(xì)名稱,、時間,、操作者；6,、較后要說的就是細(xì)胞凍存的時間了，對于標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序來說,，需要進(jìn)行梯度降溫,，降溫速率-1～-2℃/min，一旦溫度達(dá)到-25℃以下時,，那么就可增至-5℃～-10℃/min,；等到-100℃的時候，可迅速的放入到液氮之中,。

凍存細(xì)胞注意事項：凍存細(xì)胞系以備將來之用時,，必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,，以便獲得較佳結(jié)果,。在細(xì)胞處于生長期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前,。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%,。請注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,，使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基,。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,，否則在復(fù)蘇過程中有可能會炸,。

細(xì)胞凍存的注意事項：1,、各種細(xì)胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些,，骨髓干細(xì)胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細(xì)胞耐受性較小,，不宜太快,。總之在一開始時,，下降速度不能超過－10℃/分鐘,。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大,，要依細(xì)胞而定,，初代培養(yǎng)細(xì)胞用DMSO較好，一般細(xì)胞可用甘油,；用量以較小為好,。有人認(rèn)為人皮膚上皮細(xì)胞貯存在20%-30%甘油中很好。3,、原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年,，但為妥善起見，凍存一年后,，應(yīng)再復(fù)蘇培養(yǎng)一次,，然后再繼續(xù)凍存。4,、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,，要做好防護(hù)工作，以免凍壞,。5,、注意自身的安全，對于來自人源性或病毒傳染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心,。操作過程中,，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑例如DMSO,，并避免尖銳物品傷人等,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：胎牛血清取自牛，因此,，難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域,。重慶無血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話

無血清快速細(xì)胞凍存液：減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,，確保凍存細(xì)胞安全,。正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項：DMSO快速稀釋會對細(xì)胞造成滲透性損傷,，使存活率下降50%,。對于DMSO凍存的細(xì)胞,，復(fù)蘇后應(yīng)緩慢稀釋成細(xì)胞懸液：1）凍存液：培養(yǎng)基=1:1稀釋成細(xì)胞懸液后離心，然后重懸至培養(yǎng)皿中培養(yǎng),，隔天換液,；2）凍存液：培養(yǎng)基=1:10稀釋成細(xì)胞懸液，不用離心,，直接放置到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)2-4小時后,，換液。上述兩種方法都是比較常用的細(xì)胞復(fù)蘇方法,，后者更適用于原代細(xì)胞或比較難養(yǎng)的細(xì)胞,。液氮內(nèi)的細(xì)胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細(xì)胞應(yīng)一段時間內(nèi)進(jìn)行更替,。一個細(xì)胞系在培養(yǎng)一個月后,，可復(fù)蘇一管新的細(xì)胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化，傳代幾次后,，再凍存留種,。正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家