超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒專門針對多糖,,多酚等難提的植物RNA樣本提取設(shè)計(jì),,適用于棉花,甘薯,,番茄,,板栗,龍眼,,荔枝,,葡萄,番茄,,龍眼,,芒果,草莓,,百合,,獼猴桃,香蕉,,梨,,甘蔗,海棠,,蘋果,,石斛,銀杏,,小麥,,羊角吊蘭,水稻,,玉米牡丹,,月季,紅豆杉,,馬鈴薯,,白松松針,,山藥,木瓜,,吊蘭葉片RNA提,,水仙花、青花菜,、地被菊,、梅花、石斛,、毛桃,、海棠、黑加侖,、擬南芥、虎,、大豆,、草莓、冬青,、月季,、薔薇、沙棘,、冬棗,、蘆薈、仙人掌,、報(bào)春花,、唐菖蒲、櫻桃,、白玉蘭,、毛白楊、櫻花,、百合花,、紫菜、綠藻苧麻,、榛子冬青樹,,虎仗,黑加侖,,黃瓜等農(nóng)作物,,果實(shí),花卉,,蔬菜等多糖多酚,,色素等次級代謝物嚴(yán)重的植物樣本RNA提取,。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料。金華RNA提取試劑
提取RNA的詳細(xì)步驟:首先,,將研缽晾干夠,,倒入1/3體積的液氮,加入0.2g均質(zhì)的植物材料,,充分研磨后轉(zhuǎn)入一個(gè)含有300微升GMT的1.5ml的離心管中,,搖勻。然后,,加入30微升2mol/lNaAc進(jìn)行搖勻,,加入300微升酸酚搖勻,加入100微升的氯仿?lián)u勻,。然后,,在四攝氏度12000r/min下離心二十分鐘,吸取上清液的3/4,,加入等體積的異丙醇,,于冰上放置十五分鐘。然后,,在四攝氏度12000r/min下離心十分鐘,,將沉淀懸浮于含100微升的4mol/lLiCl小試管中,于-20攝氏度下放置過夜,。然后,,在4攝氏度13000r/min下離心10-15min,將沉淀溶于0.4mlDEPC處理水中,,加入1/2體積氯仿和1/2體積酸酚,,搖勻,進(jìn)行抽提,,在4攝氏度13000r/min下離心五分鐘,。將上清液中加入等體積的氯仿?lián)u勻,進(jìn)行抽提,,在四攝氏度13000r/min下離心五分鐘,,上清液中加入1/10體積3mol/lNaAc和兩倍體積的午睡乙醇與-20攝氏度放置一小時(shí)。正規(guī)RNA提取試劑銷售廠家mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板,。
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑,。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無論是人,、動物,、植物還是細(xì)菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品,,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成,。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析,、斑點(diǎn)雜交,、poly(A)+選擇、體外翻譯,、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等,。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對照顯示,公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量,。
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清,、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,利用吸附柱法從血清,、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA,。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA,、檸檬酸鈉、草酸鈉)兼容,,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作,。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,可以從普通植物的根,、莖,、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,適用于RT-PCR,、qRT-PCR,、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn),??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高,。高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,產(chǎn)量大很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能,。
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細(xì)胞,,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后,,裂解液分層成水相和有機(jī)相,。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。拭子RNA提取試劑的選擇?對離心柱法而言,,拭子核酸得率的高低,。金華RNA提取試劑
總RNA提取試劑:適用范圍普遍,可以從動物組織,。金華RNA提取試劑
RNA提取試劑注意事項(xiàng):1,、需自備氯仿,異丙醇,,DEPC,,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水,。2,、所有離心管,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染,。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,,烘干,。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,,處理過夜,,滅菌即成DEPC水,。3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些,。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品,。如果不能及時(shí)抽提RNA,,推薦先加入適量TRIReagent,,并裂解樣品后凍存,。金華RNA提取試劑