膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。貴陽鼠尾膠原廠家
要準備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,,無齒鑷1把,,200ml燒杯1個,培養(yǎng)皿1個,,帶蓋廣口瓶1個,,離心管、小瓶數(shù)個,,滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液,。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,,洗凈,,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,,用止血鉗夾住尾巴較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,,稱尾腱的重量,,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置48小時,離心,。吸取其上清,,分裝至小瓶,4℃保存,。上述制備過程均在無菌條件下完成,。開封鼠尾膠原哪里買用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。
生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,,進行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌,、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。
除了讓細胞更好貼上去,,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長,。當(dāng)然,,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,,制作止血海綿敷料等各種用途,。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料,。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,,對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,,往往會選用經(jīng)典的PCR法,。將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚,、筋,、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個亞型,。但較為常見的為Ι,、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分,,給結(jié)締組織以強度;是較豐富的膠原蛋白類型,,尤其是在皮膚真皮,、骨、筋和腱中,。布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,。開封鼠尾膠原哪里買
鼠尾膠原醋酸溶解:將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中。貴陽鼠尾膠原廠家
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5mL自組裝液,,室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,;滴加1mol/L的氯化氫,,調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),,約16滴/min,。貴陽鼠尾膠原廠家