外泌體的提取方法：1,、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來(lái),。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn),，難以普遍普及,。2、多聚物沉淀法,。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物,，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等外泌體在免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

作為一種分子通斷開(kāi)關(guān)的KRAS發(fā)生突變時(shí)會(huì)處于“開(kāi)啟”狀態(tài),。在80%～95%的胰腺導(dǎo)管腺病（PDAC）當(dāng)中,，這個(gè)基因發(fā)生突變,，這也是這種一些疾病中較為常見(jiàn)的突變。這些研究人員證實(shí)iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,，并且比他們的合成對(duì)應(yīng)物脂質(zhì)體（liposome）更加高效,。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢(shì),。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說(shuō)，“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,，外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長(zhǎng)的優(yōu)異能力,。我們也證實(shí)外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來(lái)自循環(huán)單核細(xì)胞的吞噬作用,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）,。超離法是常用的外泌體純化手段,，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示）,，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑,；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量,。2,、密度梯度離心。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),。

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,；樣本輸入量多樣,；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器,；無(wú)需沉淀試劑,，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng),；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種,；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白,；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評(píng)估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號(hào)分子,，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。外泌體的提取方法：色譜法,。

外泌體與肺病預(yù)后：在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢(shì)下,，外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù),。根據(jù)一些病癥來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,，臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定較合適的治病方案，以達(dá)到改善肺病患者生存率,，延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的,。但是，針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問(wèn)題有待廣大研究者解決,，如：外泌體的純化及標(biāo)記方法,、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等,?？偠灾饷隗w的研究有著廣闊的前景,，基于外泌體與肺病的研究,，有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和治病的有效措施，造福更多的患者,。外泌體提?。好芏忍荻入x心。開(kāi)封外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：注意抗凝劑的選擇,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的細(xì)菌大小的顆粒,。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來(lái)自美國(guó)德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究,，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法,。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士。在這項(xiàng)新的研究中,，經(jīng)過(guò)基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解,，增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌體）運(yùn)送小干擾RNA（siRNA）或短發(fā)夾RNA（shRNA）分子來(lái)靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,，從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活,。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用，這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡（即外泌體）輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞（包括病細(xì)胞）中,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷