細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,，減少細(xì)胞代謝,，以便長期儲(chǔ)存的一種技術(shù),。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用,。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,，利用凍存技術(shù)可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。目前現(xiàn)有技術(shù)中,，細(xì)胞凍存液中的主要成分有10％二甲基亞砜(DMSO)、20％～90％胎牛血清(FBS),、剩余組分為完全培養(yǎng)基,。培養(yǎng)基以及FBS可為細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)。DMSO是一種滲透性保護(hù)劑,，能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),，減少冰晶的形成，從而達(dá)到降低細(xì)胞損傷的保護(hù)效果,。但FBS屬于動(dòng)物源性物質(zhì),，成分比較復(fù)雜，在臨床應(yīng)用上存在潛在的風(fēng)險(xiǎn),，也增加了污染的幾率,，并且由于凍存液中含有動(dòng)物血清，會(huì)導(dǎo)致凍存液的成分存在不穩(wěn)定的因素,。無血清凍存液特性：不含動(dòng)物成分,。廈門開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液比較及優(yōu)勢：1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液只適用于含血清細(xì)胞的凍存，但并不適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞,，例如一些CIK細(xì)胞等,，而無血清細(xì)胞凍存液即適用于含血清細(xì)胞的凍存，又適用于無血清細(xì)胞的凍存,，是一種通用型細(xì)胞凍存液,，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株；2.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含10%胎牛血清,，因血清是動(dòng)物源性成份,，因此病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn)很高,，而無血清細(xì)胞凍存液因不含血清,，只含DMSO,、葡萄糖等營養(yǎng)成份,，較大降低了動(dòng)物血清來源病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險(xiǎn),，確保凍存細(xì)胞的安全,；3.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液含血清,，但動(dòng)物血清成分復(fù)雜，個(gè)體差異大,，且生產(chǎn)來源不穩(wěn)定,，因此批次間質(zhì)量常常不穩(wěn)定，這導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)也會(huì)受到影響,，而無血清細(xì)胞凍存液成分和配比明確,，批次間差異很小，能夠保證生長細(xì)胞狀態(tài)的穩(wěn)定性,，細(xì)胞存活率高,。徐州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色：獨(dú)特配方有效提高細(xì)胞凍存存活率及復(fù)蘇率。

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：1,、細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液,，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。2,、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,，分裝過多，細(xì)胞濃度過低,，不利于細(xì)胞的貼壁,。3、加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,，從如果你加培養(yǎng)基的太少,，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長,，從以前的資料來看,，DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是1％,。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度,。

無血清細(xì)胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身,。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存,。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔,。如果使用其他的培養(yǎng)器皿,，請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積。1.在室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘,。2.輕輕吸走上清液,，注意不要擾動(dòng)細(xì)胞團(tuán)。3.用血清學(xué)吸管以1mL的TBD-698重懸細(xì)胞,。在打散細(xì)胞團(tuán)時(shí),，盡量減少細(xì)胞聚集體分解,。4.用2mL的血清學(xué)吸管將1mL的細(xì)胞聚集體轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細(xì)胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法,，每分鐘降低1度,，隨后可以在-196°C液氮長期保存。不推薦在-80°C長期保存,。逐步降溫法：-20°C保存2個(gè)小時(shí),，然后-80°C中保存2個(gè)小時(shí)，隨后可以在-196°C液氮中長期保存,。PH,，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。

無血清細(xì)胞凍存：在細(xì)胞培養(yǎng)中,，細(xì)胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞治好,、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求,，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存,。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍,，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2/℃min,；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min,。之前,，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--20℃60分鐘--80℃過夜-液氮罐。不過,，由于步驟較多,，間隔時(shí)間又長，很容易遺忘,。之后,，人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中,，再將程序降溫盒放入-80℃冰箱,。以1℃/min的速度進(jìn)行降溫。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色：不含動(dòng)物源成分,，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低。廈門開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清凍存液用途：為確保產(chǎn)品質(zhì)量,，請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品,。廈門開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清快速細(xì)胞凍存液,，是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,，可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存,。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白（Naturalantifrereprotein），不含動(dòng)物來源的血清成分,，能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,，減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,，確保凍存細(xì)胞安全,，能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法：1,、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,，離心去除上清培養(yǎng)液。2,、加入適量的細(xì)胞凍存液,，重懸細(xì)胞，調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL,。3,、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4,、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存,。5、儲(chǔ)存條件：2-8C保存,，年有效：-20C保存,，兩年有效。廈門開封無血清細(xì)胞凍存液