外泌體,，是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物,。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,，能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。同時可獲得高純度和高回收率的外泌體——如新西蘭IZON開發(fā)的系列的外泌體排阻劑。廈門正規(guī)外泌體提取試劑廠家推薦

外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,，內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間,，其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN段等多種物質(zhì)，存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,，雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”，所以才被排出來,，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞,。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。金華正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家直接把外泌體從尿液中沉降下來,，無須分離培養(yǎng)人尿液來源細胞并收集培養(yǎng)基,。

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族,，如CD9、CD63和CD81,；細胞質(zhì)蛋白,，如肌動蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體,，截留完成后,。

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、選擇血清還是血漿,？推薦大多數(shù)研究選擇血漿,。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上,，選擇血漿可避免不必要的影響,。2、注意抗凝劑的選擇,。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān),，這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR,，肝素可以與外泌體結(jié)合,，阻止細胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本,。EDTA和雙嘧達莫（CTAD）,，CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素）,，但是還是優(yōu)于其他選擇,。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA,、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數(shù)量,。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：無需蛋白酶處理。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心，這種操作簡單,、省時,，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時,，量少,。、活細胞分泌到胞外的囊泡樣小體,，含有多種蛋白和核酸分子(DNA,、RNA、以及miRNA),。天津外泌體提取試劑價格

利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多。廈門正規(guī)外泌體提取試劑廠家推薦

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào)，進一步研究發(fā)現(xiàn),，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。廈門正規(guī)外泌體提取試劑廠家推薦