Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速裂解細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA,。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分,。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相,。RNA存在于水相中,。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),進(jìn)行密度梯度超速離心,,RNA沉淀于管底,,而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中。使用這種方法,,不但能得到高質(zhì)量的RNA,,而且能同時(shí)分離出細(xì)胞染色體DNA,。RNA提取試劑注意事項(xiàng):TRIReagent抽提總RNA的同時(shí),理論上也可抽提蛋白和DNA,。長沙RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
植物RNA提取過程:植物組織成分相對于動(dòng)物組織來說復(fù)雜多樣,,因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大,如果要完美的數(shù)據(jù)結(jié)果,,那么提取純度高,、完整性好的RNA就成了關(guān)鍵所在。植物RNA的提取一般會(huì)經(jīng)歷以下幾個(gè)過程:1.破碎細(xì)胞壁,。2.裂解細(xì)胞膜,。3.雜質(zhì)去除,包括:DNA,、蛋白質(zhì),、多糖、多酚,、次生代謝產(chǎn)物等,。4.純化和濃縮RNA。而在RNA提取過程中,,純化除雜的過程是影響RNA純度的關(guān)鍵所在,。在完整的細(xì)胞內(nèi),多糖多酚類化合物,,次級代謝產(chǎn)物,,蛋白質(zhì)如RNase等與核酸是分離的,一旦細(xì)胞破碎,,這些物質(zhì)就不可避免的會(huì)與RNA發(fā)生相互作用,。南京正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):操作安全可靠,無需酚抽提,。
BIOG血液RNA快速提取試劑盒:BIOG血液RNA快速提取試劑盒是我公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)在綜合比較了國外同類較好產(chǎn)品的基礎(chǔ)上反復(fù)研制優(yōu)化而成,,專門用于血液RNA的快速提取純化。本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液配方,,可直接從新鮮,、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的RNA,操作簡便快速,,只需15分鐘即可完成血液RNA提取,。RNA提取得率較高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA,。BIOG血液RNA快速提取試劑盒采用了較新的較好離子膜,,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化,有效地去除了蛋白,、色素,、脂類等雜質(zhì)污染,,特別適用于血液包括細(xì)菌、病菌等傳染的分子檢測,。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將50~300mg昆蟲組織放入10~15mL塑料離心管中,,加入1mL溶液A,然后用勻漿器勻漿5~20秒,。勻漿時(shí)會(huì)產(chǎn)生泡沫,但不影響提取效果,。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織,,硯磨完后加入1mL溶液A。注意:溶解溶液A沉淀,。溶液A在4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片),。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿,,在振蕩器上振蕩30秒混勻,此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀,。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來,。室溫12000rmp離心3~5分鐘,兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物,。將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,,下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),,避免觸及或吸取,。較好留下100μL上清液不取。加入等體積的溶液C,,充分顛倒混勻,。植物花總RNA提取試劑盒:可以從多糖多酚植物的根、莖,、葉以及花組織中快速提取總RNA,。
RNA的提取:眾所周知,,Trizol是一種RNA提取試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分,,壓制細(xì)胞釋放出核酸酶,,維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性,我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻,,在加入氯仿離心,,這樣的話我們的RNA就進(jìn)入了水相中,,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達(dá)到提取總RNA的目的了,。首先我們需要稱取一定量的預(yù)處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH,攪拌抽提一定時(shí)間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點(diǎn),經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當(dāng)稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了,,分別測定吸光值A(chǔ)260和A280并計(jì)算A260/A280,就可以測定RNA的提取率了,。當(dāng)然啦,,我們還可以進(jìn)行深入研究,如測定Nacl的濃度,,PH的大小,,以及抽提時(shí)間對RNA提取率的影響啦??俁NA提取試劑:適用范圍普遍,,可以從動(dòng)物組織。溫州北京RNA提取試劑
植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有CS過濾柱,,可有效去除其它雜質(zhì),。長沙RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
核糖核酸(縮寫為RNA,即RibonucleicAcid),,存在于生物細(xì)胞以及部分病菌,、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子,。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,,即A(腺嘌呤),、G(鳥嘌呤)、C(胞嘧啶),、U(尿嘧啶),,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T,。核糖核酸在體內(nèi)的作用主要是引導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,。人體一個(gè)細(xì)胞含RNA約10pg(含DNA約7pg)。與DNA相比,,RNA種類繁多,,分子量較小,含量變化大,。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA,。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長鏈非編碼RNA,。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA,、核酶、小分子RNA等,。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA,、SiRNA、piRNA,、scRNA,、snRNA、snoRNA等,,細(xì)菌也有小分子RNA(50~500nt),。長沙RNA提取試劑產(chǎn)品介紹