人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞,、免疫細胞、血小板,、平滑肌細胞等。當(dāng)其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合，進而靶細胞細胞內(nèi)的信號通路,。二是在細胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合，從而細胞內(nèi)的信號通路,。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細菌,，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。南京正規(guī)外泌體提取試劑單價

外泌體（Exosome）是細胞主動分泌的囊泡樣小體，大小均一,，直徑30-200nm，密度1.10-1.18g/ml,，來源普遍，幾乎所有細胞都可分泌,，在血液,，尿液,，唾液，腦脊液,，腹水,，乳汁等體液中普遍分布,。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中,。1996年，研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應(yīng),，開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎解答了細胞如何組織其內(nèi)部較重要的運輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘,。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受?歡迎,，但過程比較費時，且回收率不穩(wěn)定,，純度也受到質(zhì)疑。成都外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì),。

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1,、抽血技巧。操作要輕柔迅速,。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻，避免劇烈搖晃,。混勻后,，將試管固定垂直放置于離心分離器,，在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時間,，因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素,。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比較穩(wěn)定的，若時間過長將導(dǎo)致外泌體數(shù)量增加,。血小板極易因抽血時的物理因素而并釋放出外泌體，其中包括接觸,、壓力,、切力,。2、抽血時間,。除了血液黏度，體內(nèi)血液的各項指標(biāo)在1天中變化很大,。生理節(jié)律會對血小板的產(chǎn)生很大的影響,。白細胞的募集和循環(huán)系統(tǒng)中促炎細胞和細胞會隨時間變化,。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化,。目前尚無設(shè)計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化,，故應(yīng)在相同的時間采集樣本,。目前飲食是否會對EV產(chǎn)生影響尚未可知，但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環(huán)脂蛋白顆粒的類型,、數(shù)量和作用,，故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時間進行,。

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法,。常用的是超高速離心法,，該方法是被譽為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”,。該方法利用離心力從細胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體，經(jīng)過400×g,、2000×g,、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物,；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12],。超高速離心因操作簡單,，不需要復(fù)雜的技術(shù)支持，并且成本相對較低而被普遍使用,。但是該方法耗時,、產(chǎn)率低,，得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型,、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,，但也會有其他的囊泡,、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。

外泌體提?。撼叽缗抛枭V,。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography,，SEC）是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子,，分子根據(jù)其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移,，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子,。此外,，可以將不同的洗脫溶液應(yīng)用于該方法。與離心方法相比,，色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,，這可能會改變囊泡的結(jié)構(gòu),。目前,，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術(shù),。不過,，該方法耗時較長,，不適合大量樣本處理外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,。昆明外泌體提取試劑哪家好

外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。南京正規(guī)外泌體提取試劑單價

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心，這種操作簡單,、省時，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時,，量少,。、南京正規(guī)外泌體提取試劑單價