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鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性,。涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。太原正規(guī)鼠尾膠原廠家直銷
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I,、無菌10×PBS、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH,。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積,混勻,,冰上備用,。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6)使用時,,無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。金華南昌鼠尾膠原鼠尾膠原醋酸溶解:不要晃動或攪拌,。
鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加,,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提,、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟,,才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白,。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結(jié)構(gòu),,可以用來當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面(懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外)才能完成生長過程,,而有一些細(xì)胞卻總是不太給力,,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用,。這一步也被稱作涂層(coating),,給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后,細(xì)胞就能更好地貼附上去,,除了培養(yǎng)皿,,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長,。
服用膠原蛋白的注意事項(xiàng):1,、大分子膠原蛋白進(jìn)入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,,真正有效吸收的成分并不多,。2、這些食物多半脂肪含量較高,,不適合經(jīng)常食用,。高熱量、高脂肪,,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,,加速老化。如果能少吃這一類食物,,就等于減少了身體被自由基傷害的機(jī)會及皮膚出現(xiàn)黑斑,、皺紋等的風(fēng)險。3,、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,,容易引起第二特征過早的發(fā)育和成熟,,不利于出生后的嬰兒成長和發(fā)育??芍苯踊蜷g接參與細(xì)胞的附著,。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚,、筋,、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,,膠原蛋白分為20幾個亞型。但較為常見的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍,是主纖維束的主要成分,,給結(jié)締組織以強(qiáng)度,;是較豐富的膠原蛋白類型,尤其是在皮膚真皮,、骨,、筋和腱中。生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境。合肥唐山鼠尾膠原
自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,。太原正規(guī)鼠尾膠原廠家直銷
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,,制備鼠尾膠原,,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基,、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物,。結(jié)果:形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長狀態(tài)良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力,。結(jié)論:①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,,該模型是進(jìn)行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ);②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性,,它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型,。太原正規(guī)鼠尾膠原廠家直銷