鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞,。也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長環(huán)境,，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長,。1，在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,，pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長,、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長,。使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,，不宜封接。北京鼠尾膠原供應(yīng)商

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,，pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液（均需要無菌,、預(yù)冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用),，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測試),。濟(jì)南正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原醋酸溶解：不要晃動(dòng)或攪拌。

一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,，其特征在于,，步驟如下：(1)膠原紡絲液的配制：將備用的海貍鼠尾筋切成薄片，用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理，再用雙氧水溶液殺酶,；將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,，然后用乙酸溶液溶脹，把溶脹后的切片分散攪拌,，然后用濾網(wǎng)過濾,，除去雜質(zhì)及不溶脹物,，然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液,；(2)手術(shù)縫合線纖維的成形：將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中，用氮?dú)鈹D壓入含有pH＝8-11,、質(zhì)量濃度為50-80％的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,，再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90％的乙醇水溶液的脫水浴脫水，再經(jīng)過假捻器加捻,，合股后再進(jìn)入含有pH＝9-11,、質(zhì)量濃度為0.8-1.2％戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián)，經(jīng)過水浴水洗,，再經(jīng)第二次加捻,，除去水及交聯(lián)劑，干燥后,，在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線,。

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,，而引起纖維膨脹、溶解,。作為溶劑使用的酸,，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸,、硫酸,、醋酸、檸檬酸和甲酸等,。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,，所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,，適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備，但產(chǎn)品得率低,，設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,，污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,，得到高純度的膠原蛋白溶液,。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,，純度達(dá)到95%以上。

鼠尾膠原：含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,，并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要測定pH值）。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存,，切勿凍存，有效期一年,。制備鼠尾膠原：取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘。溫州正規(guī)鼠尾膠原哪家好

制備鼠尾膠原：重復(fù)步驟2,、3,，直至尾腱量夠用。北京鼠尾膠原供應(yīng)商

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法,。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動(dòng)頻率,。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑,。北京鼠尾膠原供應(yīng)商