外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細(xì)胞來源的外泌體,,包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,,釋放出帶有載體的外泌體,,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,,刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用,。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),;體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA,蛋白等物質(zhì)改變受體細(xì)胞的代謝狀態(tài),。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷,。在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,,與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。南昌正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)
來源于不同的組織的外泌體不僅具有其特異性蛋白分子,,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子,。有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制近些年剛剛開始受到關(guān)注,,與外泌體相關(guān)的被pubmed收錄的文章數(shù)量和國自然基金項(xiàng)目中標(biāo)數(shù)量逐年增長,,表明國內(nèi)外對外泌體的研究興趣日益增長。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,,包括外泌體,、微泡和凋亡小體。其中,,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,,由多種細(xì)胞分泌,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì),、脂質(zhì),、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì)。重慶正規(guī)外泌體提取試劑單價(jià)機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,,因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法,。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63,、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,,即可將外泌體吸附并分離出來,。磁珠法具有特異性高、操作簡便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以普遍普及,。2,、多聚物沉淀法,。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,,產(chǎn)生難以去除的聚合物,,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等
外泌體與神經(jīng)退行性疾病:外泌體可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,通過分析外泌體的組分,,可以幫助識別其來源的細(xì)胞類型,。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測試,。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層,。外泌體提?。好庖叻蛛x技術(shù)。
外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程,。單個(gè)miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合,,從而阻滯整個(gè)生物通路。因此,,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),與75例健康者相比,,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA(miR-25和miR-223),。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估,結(jié)果顯示,12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a、-379a,、-139-5p,、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908,。外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,,使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),。正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家
利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來,。南昌正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)
外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:純化和富集的完整血漿/血清,尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究,;樣本輸入量多樣,;無需耗時(shí)的超速離心,過濾或特殊注射器,;無需沉淀試劑,,也無需過夜培養(yǎng);無需蛋白酶處理,;適用于多種物種,;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白;可以使用NanoSight®或電子顯微鏡分析純化的外泌體,,以評估近似外泌體大小范圍和濃度,。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中,,攜帶和傳遞重要的信號分子,,形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)南昌正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)