無血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對比:傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,,統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液,。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,,然后移至-20℃冰箱30分鐘,,再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)(或隔夜),較后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存,??梢姡寮?xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),,步驟繁瑣,,耗時(shí)耗力。3.含血清,,細(xì)胞污染(病毒,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存,。無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲。珠海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
無血清快速細(xì)胞凍存液,,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來源的血清成分,,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,,確保凍存細(xì)胞安全,,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。注意事項(xiàng):請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存;凍存液加入細(xì)胞后,,請盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長期凍存細(xì)胞,,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,。蘇州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家批發(fā)價(jià)無任何外源蛋白和血清,,適用于各類動(dòng)物細(xì)胞株凍存。
凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,4℃,,3~5 min),移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。6.鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
無血清細(xì)胞凍存液:1. 逐滴加入5 - 7 mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15 mL的離心管中,,加入的同時(shí)輕輕混勻,。2. 室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘。3. 吸出培養(yǎng)基,,使細(xì)胞沉淀完好無損,。使用2 mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1 mL的培養(yǎng)基中。小心保持細(xì)胞作為聚集體,。4. 將0.5 mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,,每個(gè)冷凍管可以鋪板兩個(gè)孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細(xì)胞聚集體數(shù)量進(jìn)行調(diào)整,。通常在復(fù)蘇后,,要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細(xì)胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱,??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細(xì)胞聚集體分布均勻,。24小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)培養(yǎng)板,。無血清凍存液用途:置于-20℃保存,有效期為3年,。
無血清細(xì)胞凍存液:采用patent的凍存配方,,用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途,。用包括DMSO在內(nèi)的復(fù)合凍存保護(hù)劑替代了單一的DMSO的保護(hù)作用。復(fù)合保護(hù)劑的內(nèi)部保護(hù)劑,,易于穿透細(xì)胞膜,,避免在細(xì)胞凍存過程中細(xì)胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細(xì)胞;外部保護(hù)劑,,可在溶液形成冰晶之前,,在細(xì)胞膜外部競爭性的結(jié)合細(xì)胞膜表面的水分子,從而降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,。在細(xì)胞內(nèi)部與外部的協(xié)同保護(hù)作用下,明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細(xì)胞的損害,,因此大幅度提高了細(xì)胞經(jīng)過凍存后的復(fù)蘇存活率,。無血清凍存液特性:適合各種動(dòng)物細(xì)胞。武漢正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家好
根據(jù)密度調(diào)整細(xì)胞凍存 液用量,。珠海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,,PH,電解質(zhì)等的改變,,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。在過去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,,并配合手工使細(xì)胞從4℃,-20℃,,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達(dá)到“慢凍”的效果,。但這種自制的凍存液儲存時(shí)間一般比較短,不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求,。且這樣人力和時(shí)間成本大,,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。珠海正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家直銷