一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,,余量的水。2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來(lái)源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾,。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為創(chuàng)可貼,。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于劑型為噴霧劑。方法制作鼠尾膠原,,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。上海正規(guī)鼠尾膠原廠家
鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,,并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,,初次使用時(shí)需要測(cè)定pH值),。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,,切勿凍存,,有效期一年。長(zhǎng)沙鼠尾膠原平均價(jià)格制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,。
膠原蛋白的提取方法:1.堿法提取:堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉,、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1 %~1.5 %石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白,。由于它容易造成肽鍵水解,,因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以,,若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu),,此法不可取。2.鹽法提?。蝴}法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉,、檸檬酸鹽等,。在中性條件下,當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí),,膠原溶解,。并且可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,可以沉淀出不同類(lèi)型的膠原蛋白,。
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,,收集上清液;在冰水浴中,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,,調(diào)節(jié)pH = 6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀,。將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每 3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋,。這樣的螺旋稱(chēng)為 3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉,。將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,。蘇州正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價(jià)
將無(wú)菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室。上海正規(guī)鼠尾膠原廠家
鼠尾膠原蛋白的獲取也相當(dāng)“講究”,,首先要以無(wú)毒方法捕到家鼠,。取尾長(zhǎng)20cm以上者,齊尾根部切下尾巴,,洗凈后浸于75%酒精中,。在無(wú)菌操作下剝?nèi)ナ笪财つw,,即可見(jiàn)附于鼠尾骨上的4束韌帶。每束韌帶中,,位于外面及近骨一面的為白色纖維,,較光潔,微發(fā)亮,。纖維之間為易碎裂的間質(zhì),。而剝?nèi)ハ聛?lái)的“纖維”,就放置在嘉興眼庫(kù)中,,以供需要時(shí)及時(shí)提取,。讓小小的老鼠尾巴發(fā)揮其神奇的作用,以醫(yī)學(xué)人嚴(yán)謹(jǐn),、踏實(shí),、不斷進(jìn)取的醫(yī)學(xué)態(tài)度,讓鼠尾膠原蛋白幫助更多的人,,恢復(fù)角膜的光明,,重現(xiàn)光明的世界。上海正規(guī)鼠尾膠原廠家