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一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,,用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,再用雙氧水溶液殺酶,;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,,然后用乙酸溶液溶脹,把溶脹后的切片分散攪拌,,然后用濾網(wǎng)過濾,,除去雜質(zhì)及不溶脹物,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液,;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,,用氮?dú)鈹D壓入含有pH=8-11,、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,再經(jīng)過假捻器加捻,,合股后再進(jìn)入含有pH=9-11,、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),經(jīng)過水浴水洗,,再經(jīng)第二次加捻,,除去水及交聯(lián)劑,干燥后,,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線,。鼠尾膠原醋酸溶解:在2-8度中放置過夜。寧波唐山鼠尾膠原
使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,,用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。2,、三維膠原凝膠的制備:A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值),。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。南昌鼠尾膠原價格氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚、筋,、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,, 不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,,膠原蛋白分為20 幾個亞型。但較為常見的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍,是主纖維束的主要成分,,給結(jié)締組織以強(qiáng)度,;是較豐富的膠原蛋白類型,尤其是在皮膚真皮,、骨,、筋和腱中。
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,,包括以下步驟: (1)將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用,; (2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目,; (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,,期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液,; (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1,在4°C,,48?74小時酶解,,期間間歇性攪拌。堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉,、碳酸鈉等。
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每 3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為 3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,。溫州正規(guī)鼠尾膠原廠家批發(fā)價
將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡。寧波唐山鼠尾膠原
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每 3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為 3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。寧波唐山鼠尾膠原
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