糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體,、霉菌,、色素、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟,。冷凍切片染色時間盡量要短,。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基,。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,晾干鏡檢。細胞的組織化學方法,,是研究細胞成分常用的方法之一,。它是利用化學試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應(yīng),從而在細胞局部形成有色沉淀物,,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學成分進行定性,、定位、定量研究安徽口碑好的糖原染色試劑盒平均價格切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,,切片不能太厚。
糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存,。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色,;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色,;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒,;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒,;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色,;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān)~糖類從組織化學技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì),。
可以通過pas染色計算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì). 具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色,;在正常血片中RBC不染色; PLT染成深紅色,;中性粒細胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細胞有陽性顆粒,;單核細胞的胞漿染成淡紅色,可含有細小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒,;正常骨髓的幼稚細胞和有核RBC都不染色,;巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 巨核細胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 顏色深淺與濃度相關(guān)常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進行特殊染色。浙江提供糖原染色試劑盒推薦廠家
在滴加染液時,,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,,但不能溢出圈外,避免浪費試劑,。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實驗材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料,。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL,、甲醛10mL,。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL,。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時,過濾,,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷