鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入 690ul H2O,。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入100ul 10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,。溫州鼠尾膠原平均價格

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和,。 需要的溶液 （均需要無菌,、 預(yù)冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH,，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中,， 會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的 膠原凝結(jié)） 立即混勻。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右,，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加 酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試),。無錫正規(guī)鼠尾膠原報價可用于制備三維膠原凝膠,，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長。

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,，并重構(gòu)成膠原纖維。然后,，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6 d,，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2 d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,，膠原纖維部分礦化,；礦化6 d后，膠原纖維內(nèi)部完全礦化,，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維，經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。

鼠尾膠原蛋白I型，用那一種膠原酶可以溶解：1．將膠原加入到0.1M 的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。 4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,，這時候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。 在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì)。

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液,；在冰水浴中,，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理,，收集沉淀2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液,；在冰水浴中,，調(diào)節(jié)pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,，4°C沉淀10小時，去除上清液,，去除上清液,，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀,。鼠尾膠原醋酸溶解：在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。合肥正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)

方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,，自制的鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。溫州鼠尾膠原平均價格

膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟部位外基質(zhì)的主要成分，但在皮膚,、肌腱,、骨骼中分布*為普遍,。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結(jié)構(gòu),，被普遍用于多種細(xì)胞的培養(yǎng)基質(zhì)，如肝細(xì)胞,、纖維細(xì)胞,、脊髓神經(jīng)節(jié),、雪旺氏細(xì)胞等,。另外，I型膠原蛋白在細(xì)胞生長,、分化,、遷移和組織態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應(yīng)用。注意事項(xiàng)：1） 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。2） 整個操作請于冰上進(jìn)行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。3） 整個操作請?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作,，避免污染以影響細(xì)胞生長。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。溫州鼠尾膠原平均價格