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來源: 發(fā)布時間:2020-12-04

鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。 實驗內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘,;2,、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的,,折斷尾骨后拉出尾腱,;3、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,;4、重復(fù)步驟2,、3,,直至尾腱量夠用;5,、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克);6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中;7,、按每克尾腱50ml的比例,,加入0.1%醋酸溶液;8,、搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期,;9,、離心,,4000轉(zhuǎn)/分,10-15分鐘,;10,、吸取上清,分裝成小瓶,,4℃保存,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。青島正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家

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要準備的器具:組織剪2把,,有齒鑷1把,無齒鑷1把,,200 ml燒杯1個,,培養(yǎng)皿1個,帶蓋廣口瓶1個,,離心管,、小瓶數(shù)個,滴管若干,。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌,。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10 min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用,。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液,。取大鼠尾巴,洗凈,,置75%酒精浸泡消毒后,,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,,折斷尾骨后拉出尾腱,,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,,按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液,,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置48 小時,,離心。吸取其上清,,分裝至小瓶,,4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成,。開封正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,。

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鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究,。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導(dǎo),。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達。

服用膠原蛋白的注意事項:1,、大分子膠原蛋白進入人體后需要降解為小分子肽,、氨基酸才能被人體吸收,真正有效吸收的成分并不多,。2,、這些食物多半脂肪含量較高,不適合經(jīng)常食用,。高熱量,、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產(chǎn)生自由基,,加速老化,。如果能少吃這一類食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機會及皮膚出現(xiàn)黑斑,、皺紋等的風(fēng)險。3,、孕婦是不能服用膠原蛋白產(chǎn)品,,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,,容易引起第二特征過早的發(fā)育和成熟,,不利于出生后的嬰兒成長和發(fā)育。鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。

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鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,,可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠原凝膠,,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。制備鼠尾膠原方法:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復(fù)步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),;6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,;7,、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液,;8,、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期,;9、離心,,4000轉(zhuǎn)/分,,10-15分鐘;10,、吸取上清,,分裝成小瓶,4℃保存,。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,。廈門深圳鼠尾膠原

使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。青島正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家

鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對角膜上皮細胞增殖的影響:目的探討鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對體外培養(yǎng)角膜上皮細胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對照,培養(yǎng)角膜上皮細胞,觀察細胞形態(tài),進行細胞計數(shù)并描繪細胞生長曲線,比較不同基質(zhì)對角膜上皮細胞的增殖作用,。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細胞,細胞增殖速度較普通組快,細胞形態(tài)、活力和長勢比普通組更佳,促進增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠,。結(jié)論鼠尾膠原可促進角膜上皮細胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠,。青島正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家