三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,，pH 7左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和,。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ):10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻。鼠尾型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商

使用方法：1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被：以包被濃度為2μg/cm2為例，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,，也可以在室溫放置1小時后,，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間,。2,、三維膠原凝膠的制備：A、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,，加入690μL雙蒸水,，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要測定pH值）。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。合肥正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商鼠尾膠原醋酸溶解：稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。

鼠尾膠原，是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,，同時也是一種天然的黏附劑，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,，制備細(xì)胞爬片時,，可在瓶底涂一層膠原，再放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中,。有點學(xué)術(shù)了，聽不懂···貼壁,，有什么意義,？分散的單一細(xì)胞培養(yǎng)能夠比較理想地反映細(xì)胞的具體生物特性。選擇合適的培養(yǎng)基,，可以解決培養(yǎng)中細(xì)胞脫落和細(xì)胞重聚的現(xiàn)象,。鼠尾膠原，是一種細(xì)胞支持物,，它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份,，可直接或間接參與細(xì)胞的附著。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,，純度達(dá)到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。

I型鼠尾膠原是借鑒Navneeta Rajan, Jason Habermehl法,，經(jīng)過乙酸抽提、離心,、滅菌,、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級別產(chǎn)品,，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被），適合多種類型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,、胚胎細(xì)胞、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞,、神經(jīng)鞘細(xì)胞等,。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板，規(guī)格為6/24孔板,，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞,，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率,，細(xì)胞增殖速度快，形態(tài)均一,，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高,。鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于,，包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,，真空冷凍干燥備用,； (2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,，期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊,，得到膠原溶脹液,； (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1,，在4°C,，48?74小時酶解，期間間歇性攪拌,。制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）,。廈門鼠尾膠原廠家推薦

鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,，各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異,。止血材料是常見的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點,；同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,，導(dǎo)致傷口潰爛，或者因為粘附導(dǎo)致傳染,；再次就是止血材料多是通過吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,，很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來生產(chǎn)的。現(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素,、α -氰基丙烯酸酯類組織膠,、醫(yī)用止血明膠等,，但是都有各自的缺點,。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高,；α -氰基丙烯酸酯類組織膠降解過程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì)；醫(yī)用止血明膠黏附性較差,，易脫落,，因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商