膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,，其中每 3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋。這樣的螺旋稱為 3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃，這些棒狀分子首尾相連,，并側(cè)向排列形成膠原微絲（其直徑可從50埃至數(shù)千埃）,。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū)，這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,，使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉,。鼠尾膠原醋酸溶解：制備成濃度為0.1%的溶液。無錫正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

使用方法：1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被：以包被濃度為2μg/cm2為例,，用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開蓋在超凈臺(tái)上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時(shí)后,，用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。2,、三維膠原凝膠的制備：A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）將200μL本品加到置于冰浴的離心管中，加入690μL雙蒸水,，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）,，立即混勻,。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要測定pH值）。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。杭州正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘。

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1. 主要材料,、試劑和儀器鼠尾,、鹽酸、等滲氯化鈉溶液,、鈣液,、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀,。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈，用75%的乙醇浸泡5 min,。將尾巴剪開,，去掉皮毛,，并剪成小段，抽出銀色的肌腱,。將肌鍵剪斷置于平皿中,，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,，將肌鍵置于平皿中剪碎,，按每克肌鍵50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,，將肌鍵分散于醋酸溶液中,，4 ℃放置一周，然后以2186×g離心20 min,。在醋酸溶液的酸解下,，肌腱水解成膠凍狀凝膠，置于冰箱4 ℃保存,。

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于，包括以下步驟: 1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,，成透明澄清黏稠溶液,；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH = 6.5,，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí),，去除上清液,，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理,，收集沉淀,； 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液,，冰水浴中,，調(diào)節(jié)PH = 6.5 ;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理,；3.將脫鹽后的膠原蛋白溶液,，-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí)，然后真空冷凍干燥,，凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,，滅菌、包裝,，得到成品膠原蛋白粉末,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法,。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動(dòng)頻率,。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑,。不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,。石家莊鼠尾膠原服務(wù)電話

鼠尾膠原醋酸溶解：不要晃動(dòng)或攪拌。無錫正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,，純度達(dá)到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠，使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1,、SDS-PAGE分析純度大于95%。2,、無菌檢驗(yàn)結(jié)果為陰性,。3、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,，貼壁及生長正常。4,、本品濃度1mg/mL,，pH7.0時(shí)形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長正常,。無錫正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家