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無血清細(xì)胞凍存液,,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存,。復(fù)蘇細(xì)胞:1.將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時(shí)可準(zhǔn)備培養(yǎng)基,、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶,。2.于生物安全柜內(nèi),,直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融,使細(xì)胞團(tuán)塊化凍,。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基,,再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g,,3分鐘離心收集細(xì)胞,。4.倒去上清液,以新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,,移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基,并觀察細(xì)胞存活狀況,。細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求,。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,,PH,,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶,,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具,、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),,而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化,。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要,。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,,溫度達(dá)-196℃,,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。廈門無血清細(xì)胞凍存液推薦廠家降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,。
無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年),。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,,Chemicalbook不含血清,,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,,保證凍存細(xì)胞的安全,。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)技術(shù),,通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,,由于血清含有異源成分且生長(zhǎng)過程中可能帶來的風(fēng)險(xiǎn)Chemicalbook,故傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究,。本產(chǎn)品完全由化學(xué)成分組成,,無動(dòng)物來源,,目前測(cè)試可以很好的凍存T細(xì)胞,NK細(xì)胞以及MSC等細(xì)胞,。
無血清凍存液使用方法:1,、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,離心去除上清培養(yǎng)液,。2,、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL,。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,。4,、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5,、儲(chǔ)存條件:2-8C保存,,年有效:-20C保存,兩年有效,。無血清凍存液注意事項(xiàng):1,、請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2,、凍存液加入細(xì)胞后,,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存。3,、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4,、若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5,、凍存液中含DMSO成分,,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,。PH,,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡,。
凍存溫度:凍存溫度是指能長(zhǎng)期保存細(xì)胞的較低溫度,,在此溫度下,細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止,,但經(jīng)過長(zhǎng)期保存,,在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能,。 不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同,。但從實(shí)際和效益的觀點(diǎn)出發(fā),,液氮溫度-196℃是 目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時(shí),,細(xì)胞的生命活動(dòng)幾乎完全停止,,但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過程得當(dāng),,一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上,。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞,短期內(nèi)對(duì)細(xì)胞的活性無明顯影響,,但隨著凍存時(shí)間延長(zhǎng),,細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點(diǎn)到-40℃范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳,。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。唐山無血清細(xì)胞凍存液?jiǎn)蝺r(jià)
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:2-8℃即可穩(wěn)定保存,,無需冷凍,,即取即用。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)
細(xì)胞凍存液的配置成分及比例: 細(xì)胞凍存液是含10%DMSO或甘油,、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液,。在凍存前比較好換一次培養(yǎng)液。 配置方法: 1,、將DMSO和小牛血清加入培養(yǎng)液中,各自含量占總體積的10%; 2,、然后用濾膜過濾配置好的細(xì)胞凍存液; 3、用**保存瓶分裝保存?zhèn)溆眉纯?15%(常見為10%)的DMSO或甘油,,含10%-20%血清的凍存培養(yǎng)液,。一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),,另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),,如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞,。有人親測(cè)10%血清凍存細(xì)胞,,結(jié)果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細(xì)胞活力,,此外嬌貴的細(xì)胞可以適當(dāng)提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力,。蘇州無血清細(xì)胞凍存液廠家供應(yīng)