無血清細胞凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),,大部分的干細胞,,凍存細胞可在-80℃長期保存。不含動物源性蛋白,,不含血清成分,,可有效減少各類細菌,、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全,。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢:1、無需程序性降溫,,可直接將細胞置于-80℃凍存,,凍存液無需稀釋。2,、細胞可于-80℃長期保存,。3、凍存液不含血清等,,較大降低細胞污染的可能性,。保存方法:冰袋運輸,4℃保存,,保質(zhì)期一年,。含多種保護劑成分,一些保護劑,易于穿透細胞。開封無血清細胞凍存液服務(wù)電話
無血清細胞凍存液:產(chǎn)品優(yōu)勢:1.化學(xué)成分明確,,無任何外源蛋白和血清,,適用于各類動物細胞株凍存。 2.無需程序降溫,,細胞復(fù)蘇率90%以上,。 3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年,。 4.即用型產(chǎn)品,,4℃可穩(wěn)定保存。細胞凍存:1.收集融合率>90%的對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中,。2.1000 rmp離心5分鐘,,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀,。3.加入適量細胞凍存液于離心管中,,使細胞濃度為1x106~1x107 cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液,。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中,,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩(wěn)定凍存數(shù)年,。6.如若長期保存,,可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。杭州正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細胞凍存液使用方法:直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,,長期冷凍保存,。
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗,。而且適度地保存一定量的細胞,,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用,。為什么要進行細胞凍存,?連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細胞系較終會發(fā)生衰老,,所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染,,即使運轉(zhuǎn)情況較好的實驗室也會遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,,更換細胞系成本高昂,,而且耗費時間,因此,,十分有必要將細胞冷凍起來長期保存,。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買,、寄贈,、交換和運送某些細胞。
細胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林,、10~20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞,,除去舊細胞培養(yǎng)液,用PBS清理,。3.除去PBS,,添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,5min;5.除去蛋白酶,,添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液,,用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱,記數(shù),,調(diào)整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中,,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細胞的名字,凍存時間及作業(yè)者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達-25℃下列時,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,,則可快速滲入液態(tài)氮中,。也可將配有體細胞的凍存管放進-20℃電冰箱2h,隨后放進-70℃電冰箱中留宿,,取下凍存管,,移進液氮容器內(nèi)。即用型產(chǎn)品,,4℃可穩(wěn)定保存,。
細胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:1,、液氮內(nèi)的細胞凍存較長時間不要超過半年,,凍存在液氮中的細胞應(yīng)一段時間內(nèi)進行更替。一個細胞系在培養(yǎng)一個月后,,可復(fù)蘇一管新的細胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化,,傳代幾次后,再凍存留種,。2,、細胞復(fù)蘇時,為保證獲得較高的存活率和接種率,,應(yīng)盡可能的快速完成復(fù)蘇,,以避免在升溫過程中細胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。書面介紹的復(fù)蘇溫度是37℃-42℃,,但是本人在實際操作中發(fā)現(xiàn)40℃環(huán)境下復(fù)蘇效果較好,。3.復(fù)蘇時使用的培養(yǎng)基和凍存時使用的培養(yǎng)基中的血清盡量保證同一批次。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:不含牛血清,,無動物源組分,。合肥正規(guī)無血清細胞凍存液廠家直銷
隨著細胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,,因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運而生,。開封無血清細胞凍存液服務(wù)電話
無血清細胞凍存液用途:1.無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存,。2.無血清細胞凍存液用于T淋巴細胞,、NK細胞等免疫細胞的存儲。3.無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存,。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,,無動物源組分。傳統(tǒng)的凍存液,,一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成,。胎牛血清取自牛,因此,,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域,。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,無動物源組分,。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,,無需冷凍,即取即用,。為了避免反復(fù)凍融,,傳統(tǒng)的細胞凍存液,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存,。無血清細胞凍存液,,2-8℃保存即可,無需再進行分裝,。開封無血清細胞凍存液服務(wù)電話