大腸桿菌屬于革蘭氏陰性菌，又被稱為大腸埃希氏菌,。該菌種屬于動(dòng)物腸道內(nèi)正常的寄居菌種,，在人體機(jī)體正常時(shí),，和人體屬于互利共生關(guān)系,，但是在人體的機(jī)體出現(xiàn)抵抗力下降時(shí)，會(huì)發(fā)病引起機(jī)體出現(xiàn)病變,。如果大腸桿菌出現(xiàn)在泌尿系統(tǒng),，會(huì)引起泌尿系統(tǒng)傳染，常見的病變有下尿路傳染,、急性腎盂炎等,。胃腸手術(shù)后如果出現(xiàn)腹腔傳染，也可能是大腸桿菌引起的。此外,，大腸桿菌侵襲呼吸系統(tǒng)時(shí),，會(huì)造成呼吸道傳染。出現(xiàn)大腸桿菌傳染時(shí),，可以口服喹諾酮類進(jìn)行醫(yī)治,，例如環(huán)丙沙星、左氧氟沙星,、氧氟沙星等藥物,，也可以口服頭孢菌素類藥物進(jìn)行醫(yī)治，例如頭孢克肟,、頭孢克洛,、頭孢呋辛等藥物。菌株的選擇應(yīng)根據(jù)其應(yīng)用領(lǐng)域的需求,，如醫(yī)學(xué),、環(huán)境、農(nóng)業(yè)等,。深海類香味菌菌株

對銅綠假單胞桿菌的復(fù)蘇,，要先準(zhǔn)備一個(gè)茶缸或1000毫升的燒壞，內(nèi)裝2/3杯37攝氏度的溫水,，從液氮中取出凍存管,、迅速置于溫水中并不斷攪動(dòng)。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內(nèi)融化,。打開凍存管,，將細(xì)胞懸液吸到離心管中,。1000rpm離心10分鐘,，棄去上清液。沉淀加10毫升培養(yǎng)液,，吹打均勻,，再離心10分鐘，棄上清液,。加適當(dāng)培養(yǎng)基后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,，37攝氏度培養(yǎng)，第二天觀察生長情況,。器材通常為液氮罐,、凍存管（塑料螺口凍存管或安瓿瓶）、離心管,、吸管,、離心機(jī)等。試劑通常為0.25％胰酶,、培養(yǎng)基,、含保護(hù)劑的培養(yǎng)基（即凍存液）,。凍存液配制是培養(yǎng)基加入甘油或DSMO，使其終濃度達(dá)5—20%,。保護(hù)劑的種類和用量視不同細(xì)胞而不同,。配好后4攝氏度下保存。橄欖包毛殼菌種菌株的生長周期,、適應(yīng)性和群體行為也是研究的重要方面,。

銅綠假單胞桿菌的載體保藏法是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤,、沙子,、硅膠、濾紙上,，而后進(jìn)行干燥的保藏法,，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)普遍，寄主保藏法用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,，如病毒,、立克次氏體、螺旋體等,，它們必須在生活的動(dòng)物,、昆蟲、雞胚內(nèi)影響并傳代,，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法,。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。冷凍保藏法可分低溫冰箱(-20-30攝氏度,，-50-80攝氏度),、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70攝氏度)和液氮(-196攝氏度)等保藏法。冷凍干燥保藏法先使微生物在極低溫度(-70攝氏度左右)下快速冷凍,，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥),。

導(dǎo)致腹瀉的大腸埃希菌根據(jù)血清型的不同，分為腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）,、腸致病性大腸桿菌（EPEC）,、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）、腸出血性大腸桿菌（EHEC）,、腸集聚型大腸桿菌（EAEC）,、產(chǎn)志賀毒的大腸桿菌（STEC，可引起出血性結(jié)腸炎和溶血尿毒綜合征）等,。大腸桿菌主要是侵襲力,、內(nèi)有害物質(zhì)、腸有害物質(zhì)等致病因素引起各種炎癥，如膽囊炎,、泌尿系傳染,、肺炎、新生兒腦膜炎,、傷口傳染,、菌血癥及腹瀉等。大腸桿菌腸有害物質(zhì)是引起腹瀉的主要致病因子,。內(nèi)有害物質(zhì)還可引起發(fā)熱,、休克、DIC等,。菌株在醫(yī)藥領(lǐng)域中具有普遍的應(yīng)用,，可制備疫苗等。

銅綠假單胞桿菌在緩慢的凍結(jié)條件下,，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,，貯存在－130攝氏度以下的低溫中能減少冰晶的形成。細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)速度要快,，使之迅速通過細(xì)胞較容易受損的－5～0攝氏度,，細(xì)胞仍能生長，活力受損不大目前常用的保護(hù)劑為二甲亞砜（DMSO）和甘油,，它們對細(xì)胞無毒性,，分子量小，溶解度大,，易穿透細(xì)胞,。合適的銅綠假單胞桿菌溫度通常在45～68攝氏度之間(預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2攝氏度間隔進(jìn)行)。另外,，由于在60～68攝氏度間,，也有很高的活性，因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定銅綠假單胞桿菌溫度,，進(jìn)行2StepPCR,。銅綠假單胞桿菌溫度為68攝氏度時(shí),，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘,；當(dāng)溫度設(shè)定在68攝氏度以下時(shí)，時(shí)間設(shè)定可稍長一些,。菌株資源的開發(fā)和利用需要注重環(huán)境債務(wù)和社會(huì)責(zé)任等方面的考慮,。深海類香味菌菌株

菌株資源的維護(hù)和保護(hù)需要關(guān)注可持續(xù)性和可復(fù)制性的問題。深海類香味菌菌株

實(shí)驗(yàn)室所配備的離心機(jī)應(yīng)在生物安全柜或本標(biāo)準(zhǔn)4.2.2中所指的其他安全設(shè)備中使用,，否則必須使用安全密封的專門用的離心杯,。必須給實(shí)驗(yàn)室工作人員配備必要的人員防護(hù)用品。實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建造的特殊要求。包括：實(shí)驗(yàn)室的選址,、平面布置,、實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)、通風(fēng)空調(diào),、安全裝置及特殊設(shè)備等設(shè)計(jì)與建造的特殊要求,。 安全操作流程：本標(biāo)準(zhǔn)針對不同等級的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室所規(guī)定的安全操作流程，包括標(biāo)準(zhǔn)的安全操作流程和特殊的安全操作流程,，必須在實(shí)驗(yàn)室的生物安全手冊中明列并加以執(zhí)行,。針對不同的微生物及其病毒應(yīng)補(bǔ)充規(guī)定相應(yīng)的特殊安全操作流程，也應(yīng)在各實(shí)驗(yàn)室的生物安全手冊中明列并加以執(zhí)行,。病原微生物及其病毒在實(shí)驗(yàn)室之間的傳遞,，病原微生物及其病毒在實(shí)驗(yàn)室之間的傳遞必須嚴(yán)格按照國家現(xiàn)行有關(guān)管理辦法執(zhí)行。深海類香味菌菌株

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