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龍膽紫血液瓊脂基礎

來源: 發(fā)布時間:2023-05-08

天然培養(yǎng)基血清種類:目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等,。選擇用牛血清培養(yǎng)細胞的原因:來源充足,、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解,。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適,。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能,。牛血清分為小牛血清,、新牛血清、胎牛血清,。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛,;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛,。顯然,,胎牛血清是品質比較高的,因為胎牛還未接觸外界,,血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分較少,。無血清培養(yǎng)基是在常規(guī)培養(yǎng)基中添加多種蛋白質、生長因子等等營養(yǎng)物質來代替動物血清,。龍膽紫血液瓊脂基礎

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基有天然,、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,,以雙蒸或三蒸水配制,。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,,則大多數(shù)細胞不能生長,。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理,。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清),。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,,置4℃冰箱存放待用,。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,,一般用10—15%,。由于血清成分復雜、條件不易控制,,可選用無血清培養(yǎng)基,。布氏菌疫苗液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基根據(jù)其組成、用途,、酸堿度等不同因素分類,,如營養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基,、麥康凱培養(yǎng)基等,。

龍膽紫血液瓊脂基礎,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是高中生物很重要的一個知識點,種類多且復雜,,所以學起來也是比較難的,。下面小編給大家介紹一下培養(yǎng)基的分類,一起來了解一下培養(yǎng)基吧,!培養(yǎng)基是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質,。一般都含有碳水化合物,、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質,。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同及科學研究的目的或生產實踐的需要不同,,因而培養(yǎng)基的種類很多,。迄今為止,已有數(shù)千種不同的培養(yǎng)基,。

長時間高溫還會引起磷酸鹽,、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂,、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,,避免培養(yǎng)基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA),。還可以將含鈣,、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽,、碳酸鹽分別進行滅菌,,然后再混合,避免形成沉淀,;高壓蒸汽滅菌后,,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調整,。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類,。

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細胞培養(yǎng)過程中,,細胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎物質,,也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細胞體外培養(yǎng)時需要加入血清,,以維持細胞的生長和存活,。而除了血清之外,部分細胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態(tài),。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據(jù)細胞類型判斷,。培養(yǎng)基通常由培養(yǎng)基粉末和水混合而成,。龍膽紫血液瓊脂基礎

有些培養(yǎng)基需要添加血清或其它富含蛋白質的物質以促進生長。龍膽紫血液瓊脂基礎

動物細胞培養(yǎng)必需的溶液,,平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,。PH調整液:3.7%、5.6%,、7.4%的NaHCO3溶液,、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液,、膠原酶溶液,。1)青、鏈霉素,,每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素,。2)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3)制霉菌素:濃度25U/ml,,小瓶分裝,,每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清,。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,,前者來源少,價格高,;后者要求剛產下尚未哺乳的小牛,,因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質,、氨基酸,、葡萄糖等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白,。龍膽紫血液瓊脂基礎

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